Zwiększony obrót DC do węzłów chłonnych i nadwrażliwość kontaktowa w myszach z niedoborem cząsteczki adhezyjnej A z adhezją

Łącznikowa cząsteczka adhezyjna-A (JAM-A) jest transbłonowym białkiem adhezyjnym eksprymowanym na połączeniach śródbłonka i w leukocytach. W niniejszej pracy odkryliśmy, że DC wyrażają również JAM-A. Aby ocenić znaczenie biologiczne tej obserwacji, Jam-A. /. wytworzono myszy i zbadano funkcjonalne zachowanie DC in vitro i in vivo. In vitro, Jam-A. /. DC wykazały selektywny wzrost losowej ruchliwości i zdolności do transmigracji przez limfatyczne komórki śródbłonka. In vivo, Jam-A (3). myszy wykazywały zwiększoną migrację DC do węzłów chłonnych, czego nie obserwowano u myszy z niedoborem białka ograniczonym śródbłonkiem. Ponadto zwiększona migracja DC do węzłów chłonnych była związana ze zwiększoną nadwrażliwością kontaktową (CHS). Eksperymenty przeniesienia adopcyjnego wykazały, że DC pozbawione JAM-A. wywoływały zwiększone CHS u myszy Jam-A + / +, dodatkowo wspierając koncepcję efektu specyficznego dla DC. W ten sposób zidentyfikowaliśmy tutaj nowatorską, niepotrzebną rolę JAM-A w kontrolowaniu ruchliwości DC, przemytem do węzłów chłonnych i aktywacji odporności swoistej. Wstęp Junkalna cząsteczka adhezyjna-A (JAM-A) to transbłonowa glikoproteina o wielkości 32 kDa obecna w komórkach śródbłonka, komórkach nabłonka, płytkach krwi i leukocytach. W śródbłonku i kilku rodzajach nabłonka, JAM-A znajduje się w połączeniach międzykomórkowych i kodistyka przy ścisłych komponentach łączących (1). Inni członkowie rodziny JAM (JAM-B i JAM-C) zostali ostatnio zidentyfikowani (2, 3). Cząsteczki te mają bardziej ograniczoną dystrybucję komórek, ale tę samą lokalizację przy ścisłych skrzyżowaniach (4. 6). Segment zewnątrzkomórkowy JAM-A zawiera odpowiednio dwie domeny Ig-podobne, koniec aminowy (typ VH) i koniec karboksylowy (typ C2). W roztworze rekombinowane rozpuszczalne białko, które odpowiada całej zewnątrzkomórkowej domenie JAM-A, wiąże się w sposób homofilny, wspierając ideę, że JAM-A może pośredniczyć w homotypowej adhezji komórka-komórka (7). Analiza struktury rentgenowskiej sugeruje, że JAM-A tworzy homodimery równoległe i niekowalentne, które mogą odsłonić na powierzchni komórki warstwę adhezyjną dla interakcji homofilnych (8). Ze względu na rozkład połączeń JAM-A może kontrolować transeptotelialną migrację leukocytów. Stwierdziliśmy, że mAb anty-JAM-A (BV11) było w stanie zmniejszyć infiltrację zarówno monocytów, jak i komórek polimorfojądrowych w modelach zapalenia in vivo u myszy (1, 9). Mechanizm działania JAM-A w promowaniu transmigracji komórek pozostaje nieokreślony. Sugerowano, że może ona odgrywać rolę w wiązaniu leukocytów i kierowaniu ich transmigracją przez połączenia śródbłonkowe. Stwierdzono, że JAM-A wiąże integrynę leukocytarną L-a2 (10), ale może również występować homofilne wiązanie śródbłonkowego i leukocytowego JAM-A. Nowsze dane (11) pokazują, że śródbłonkowy JAM-A może reorganizować się na skrzyżowaniach podczas migracji przez leukocyt, tworząc przejściowy pierścień wokół transmigracji leukocytów. Sugeruje to, że JAM-A może aktywnie promować przechodzenie komórek przez pojedynczą warstwę śródbłonka, prawdopodobnie tworząc strukturę podobną do tunelu na skrzyżowaniach śródbłonka. DC odgrywają kluczową rolę w aktywacji swoistej odporności (12), a handel do wtórnych narządów limfatycznych ma kluczowe znaczenie dla ich funkcji. W niniejszym artykule informujemy, że DC wyrażają JAM-A. Aby ocenić rolę tego białka w migracji DC i w aktywacji odpowiedzi komórek T, Jam-A. /. wygenerowano myszy. Myszy z niedoborem JAM-A wykazały zwiększoną in vitro i in vivo migrację DC i zwiększoną nadwrażliwość kontaktową (CHS). Analiza genetyczna wykazała, że rola JAM-A w przemycie DC jest niezależna od jej ekspresji w śródbłonku. Zatem ekspresja JAM-A ma ujemną rolę w regulacji migracji DC do węzłów chłonnych i aktywacji odporności swoistej. Wyniki Generowanie Jam-A. /. myszy. Jam-A. /. myszy wytworzono przez wytworzenie allelu Allelu Jam-A i krzyżowanie tych zwierząt z myszami CAG-Cre (13). Wektor celujący został zaprojektowany tak, aby miejsce LoxP i floxed kaseta oporności pGK-neo zostały wstawione do 5. Region UTR i odpowiednio do intronu genu Jam-A (Figura 1A). Rysunek Charakterystyka Jam-A. /. i śródbłonkowy Jam-A. /. myszy. (A) Pokazano docelowy allel zawierający 3 miejsca LoxP (flox / flox), wycięty allel (Jam-A (3 / y) i allel WT (Jam-A + / +). (B) Genomowa PCR biopsji mysich ogonów. Aby zidentyfikować Jam-A. /. myszy otrzymane z krzyżowania myszy heterozygotycznych, zastosowano kombinację starterów CAG. Cre-F, CAG. Cre-R, TS379, TS512, TS447 i TS444 LoxP. Aby zidentyfikować śródbłonkowy Jam-A. /. myszy, zastosowano kombinację starterów Tie-2 Cre, TS379 i TS512
[przypisy: największa wagina na świecie, rezonans magnetyczny puławy, bytovia hpu pl ]
[przypisy: szpital powiatowy mikołów, porozumienie rodzicielskie wzór, poradnia rodzinna zdrowie ]
[podobne: szpital powiatowy mikołów, porozumienie rodzicielskie wzór, poradnia rodzinna zdrowie ]