Wydalanie ludzkiej mitochondrialnej deformylazy peptydowej, nowy cel antyrakowy antybiotyków na bazie aktynoniny ad 6

Wielkość guza mierzono co 3-5 dni za pomocą suwmiarki. Actinonin podawana zarówno ip jak i doustnie znacząco hamowała wzrost heteroprzeszczepów ludzkiego guza prostaty (* P <0,005). (B) Gruboskrzydłe myszy nagie myszy z ludzkimi drobnokomórkowymi rakami płuca A549 były traktowane kontrolą nośnika (puste kółka) lub aktynominą w dawce 150 mg / kg śródotrzewnie (wypełnione trójkąty) raz dziennie przez 2 tygodnie (z wyjątkiem weekendów) tak szybko jak tylko guki sc były wyczuwalne. Wielkość guza mierzono co 3-5 dni za pomocą suwmiarki. Actinonin znacząco hamował wzrost ksenoprzeszczepu ludzkiego raka płuca (** P <0,01). Dyskusja Biochemia deformacji białka w różnych organizmach innych niż ssaki jest bardzo interesująca ze względu na możliwość wykorzystania enzymów zaangażowanych jako cele do interwencji terapeutycznych. Bakteryjny PDF został szeroko przebadany i obecnie jest uważany za cel w rozwoju leków przeciwbakteryjnych (16, 17, 32. 38). Celem tej pracy było ustalenie, czy nowo odkryta ludzka mitochondrialna deformylaza była celem aktynoniny i czy aktynonina miała szeroką aktywność terapeutyczną raka. Początkowo APN był uważany za właściwy cel aktynoniny w komórkach ssaków (39, 40). Jednak poprzednie prace w naszym laboratorium (20, 21) wykazały, że antynukleotyczna aktywność aktynoniny, peptydomimetycznego antybiotyku, nie jest mediowana przez APN. To odkrycie, w połączeniu ze znanymi działaniami bakteriobójczymi związanymi z aktynoniną, które wynikają z zahamowania PDF (5, 6, 22), skłoniło nas do zbadania możliwości, że HsPDF może być ważnym enzymem w ludzkich komórkach, a tym samym potencjałem cel aktyniny w komórkach nowotworowych. Dlatego też zbadaliśmy możliwość, że funkcjonalne ludzkie białko peptyd-deformylaza może być potencjalnym celem dla nowych leków przeciwnowotworowych. Pokazujemy tutaj, że HsPDF ulega ekspresji w ludzkich mitochondriach i może selektywnie deformować modelowe ludzkie mitochondrialne formylowane białka N-metionylowe. Co więcej, pokazujemy, że aktynonina i liczne nowo zaprojektowane chemiczne analogi, które są zdolne do silnego hamowania HsPDF, wszystkie powodują silne działanie antyproliferacyjne na komórki nowotworowe. Ponadto, redukcja siRNA mRNA HsPDF i białka powoduje zmniejszenie proliferacji komórek nowotworowych. Na koniec pokazujemy, że aktynonina jest aktywnym i tolerowanym czynnikiem przeciwnowotworowym w modelach heteroprzeszczepów ludzkich guzów litych u myszy. Przeszukania w bazie danych genomu ujawniły, że istnieje ludzki homolog Pdf (10) i że wydedukowana sekwencja aminokwasowa wykazuje znaczące podobieństwa sekwencji do E. coli PDF (EcPDF), w tym kluczowe reszty katalityczne. Zakodowane ludzkie białko, HsPDF, okazało się być enzymatycznie aktywne w obecności różnych N-formylowanych peptydów (13-15). Nasze wyniki potwierdziły, że HsPDF jest enzymatycznie aktywny dla generycznych peptydów N-formylowanych, a ponadto ma jeszcze większą aktywność dla peptydów, które naśladują koniec N ludzkich kodowanych mitochondrialnie białek. Wykazaliśmy również, że HsPDF jest zlokalizowany w mitochondriach na podstawie N-końcowej sekwencji targetowania. Pełną funkcję i znaczenie HsPDF w ludzkich komórkach należy jeszcze określić. Ostatnio Nguyen i in. (14) zasugerowali, że HsPDF prawdopodobnie jest pozostałością ewolucyjną bez jakiejkolwiek funkcjonalnej roli w formylowaniu / deformylacji białka, w oparciu o słabą aktywność katalityczną HsPDF. Natomiast Serero i in. (15) konkludują, że ludzkie mitochondria mają funkcjonalny ludzki PDF, który bierze udział w zachowanym szlaku NME. Nasze dane potwierdzają wniosek, że HsPDF jest enzymem funkcjonalnym umiejscowionym w mitochondriach. Przedłużamy to, aby pokazać, że HsPDF jest ważny dla wzrostu i przeżycia komórek nowotworowych i jest celem nowej klasy małych cząsteczek. Wnioski te są zgodne z danymi z systemów roślinnych i bakteryjnych. Wykazano ekspresję roślinnych i pasożytniczych PDF w organellach, takich jak plastydy i mitochondria (10-12, 41, 42). HsPDF jest kodowany przez jądro, ale przewiduje się, że jest zlokalizowany w mitochondriach (11, 43). Prognozę oparto na uświadomieniu sobie, że jedynymi powstającymi białkami wymagającymi deformacji w komórkach eukariotycznych są te syntetyzowane na rybosomach mitochondrialnych. Potwierdziliśmy teraz tę lokalizację mitochondrialną. Co więcej, wyższa swoistość HsPDF w kierunku 2 formowanych peptydów (fMAHA i fMTMH) zaprojektowanych do naśladowania sekwencji N-końcowej 2 kodowanych mitochondrialnie białek wspiera ideę, że HsPDF ewoluuje do deformacji białek syntetyzowanych w ssaczych mitochondriach.
[patrz też: zielone koktajle przepisy, kamil juraszek, porozumienie rodzicielskie wzór ]
[hasła pokrewne: narodowy fundusz zdrowia sanatorium, dlaczego ziewanie jest zaraźliwe, bytovia bytów ]
[przypisy: narodowy fundusz zdrowia sanatorium, dlaczego ziewanie jest zaraźliwe, bytovia bytów ]