Hepatic Niemann-Pick C1 Jak 1 reguluje stężenie cholesterolu w żółci i jest celem ezetymibu ad 5

Wartości są średnie. SEM z 4 próbek. (D) Skład FA lipoproteiny CE określono jak opisano w Metodach dla samców myszy WT i L1-Tg112. Wartości są sumą procentów nasyconych (16: 0 i 18: 0) i jednonienasyconych (16: i 18: 1) FA podzielonych przez procent wielonienasyconych (18: 2, 20: 4, 20: 5, i 22: 6) FA. * P <0,05 względem WT (test ucznia). Continue reading „Hepatic Niemann-Pick C1 Jak 1 reguluje stężenie cholesterolu w żółci i jest celem ezetymibu ad 5”

Mucyna komórkowa MUC1 jest krytycznym elementem bariery śluzówkowej dla infekcji czesc 4

Pomimo rozwoju ogólnoustrojowej infekcji, Muc1. /. u myszy nie wystąpiła biegunka ani jawne oznaki choroby, z wyjątkiem zmniejszonego przyrostu masy ciała 1. 3 dni po zakażeniu w porównaniu z niezakażonym Muc1. /. Continue reading „Mucyna komórkowa MUC1 jest krytycznym elementem bariery śluzówkowej dla infekcji czesc 4”

Mucyna komórkowa MUC1 jest krytycznym elementem bariery śluzówkowej dla infekcji ad 11

Myszy pozbawiono makrofagów przez wstrzyknięcie ip mg karageniny-. (IV) (Sigma-Aldrich) w 200 ul PBS, pH 7,2, 48 godzin przed inokulacją doustną bakteriami. Myszy zubożono w neutrofile przez wstrzyknięcie ip 150. G przeciwciała RB68C5 w 200. L PBS dziennie przez 3 dni przed włączeniem dnia prowokacji bakteriami. Continue reading „Mucyna komórkowa MUC1 jest krytycznym elementem bariery śluzówkowej dla infekcji ad 11”

Nadciśnienie z docelowej ablacji chromograniny A może zostać uratowane przez ortologa człowieka ad 8

Wyizolowaliśmy 2 nachodzące na siebie mysie klony genomowe Chga z biblioteki izogenicznej (mysi szczep 129 / Sv) genomowego DNA (w faga lambda-FIX [Stratagene], z Instytutu Burnhama, La Jolla, Kalifornia, USA). Trzy ramiona izogenicznego genomowego DNA Chga wstawiono do wektora pFlox (Figura 1). Komórki ES (szczep CJ7, pochodzący od myszy 129 / Sv) transfekowano 40 .l liniowego konstruktu kierującego przez elektroporację (450 V, 250 .F). Po początkowej selekcji wybrano pojedynczą (pozytywną) selekcje aminoglikozydu G-418 (genetyna, 0,3 mg / ml), 192 dodatnie (to znaczy oporne na G-418a) i sklonowano. Przeszukiwanie pozytywnego klonu przeprowadzono za pomocą analizy Southern blot. Continue reading „Nadciśnienie z docelowej ablacji chromograniny A może zostać uratowane przez ortologa człowieka ad 8”

Wprowadzenie wirusa paragrypy do komórek jako cel przerywania choroby układu oddechowego u dzieci ad 5

Białka HN o zwiększonym powinowactwie do receptora lub o zmniejszonej aktywności enzymatycznej (rozszczepianie receptorów) pozostają w stanie związanym z ich receptorem dłużej niż białka HN WT. Zarówno aktywność wiązania z receptorem na powierzchni komórki, jak i aktywność neuraminidazy białka HN, poprzez wpływ na czas trwania oddziaływania receptora HN, regulują aktywację białka F i promocję fuzji. Intrygujący zmutowany wirus to taki, który zawiera zmianę (P111S) w regionie trzonu cząsteczki HN wraz z globularną mutacją głowy, która zmniejsza aktywność neuraminidazy. Podczas gdy wirusy z tą cząsteczką HN są rzeczywiście pozbawione neuraminidazy, są wadliwe w promowaniu fuzji komórek, w przeciwieństwie do tego, co można przewidzieć (30). Było to pierwsze wskazanie, że istnieje oddzielna funkcja białka HN, która specyficznie wyzwala białko F i że znajduje się w regionie łodygi białka. Continue reading „Wprowadzenie wirusa paragrypy do komórek jako cel przerywania choroby układu oddechowego u dzieci ad 5”

Identyfikacja ludzkiego współczynnika konduktów 1 z moczem jako nowego inhibitora wzrostu kryształów szczawianu wapnia

Wcześniejsze badania nad białkami, które hamują tworzenie się kamieni nerkowych, wykazały stosunkowo niewielką liczbę dobrze scharakteryzowanych inhibitorów. Identyfikacja dodatkowych inhibitorów kamiennych zwiększyłaby zrozumienie patogenezy i patofizjologii kamicy nerkowej. Połączyliśmy konwencjonalne metody biochemiczne z ostatnimi postępami w dziedzinie spektrometrii mas (MS) w celu zidentyfikowania nowego inhibitora wzrostu kryształów szczawianu wapnia (CaOx) w normalnym ludzkim moczu. Anionowe białka wyizolowano przez adsorpcję DEAE i rozdzielono przez filtrację żelu HiLoad 16/60 Superdex 75. Frakcję o silnej aktywności hamującej wzrost kryształów CaOx wyizolowano i oczyszczono metodą chromatografii anionowymiennej. Continue reading „Identyfikacja ludzkiego współczynnika konduktów 1 z moczem jako nowego inhibitora wzrostu kryształów szczawianu wapnia”

Identyfikacja ludzkiego współczynnika konduktów 1 z moczem jako nowego inhibitora wzrostu kryształów szczawianu wapnia ad 8

Zawiesinę przesączono przez filtr ze spiekanego szkła i placek przemyto 0,01 M Tris-HCl w 0,05 M NaCl (pH 7,3), aż przesącz stał się bezbarwny. Zaadsorbowane białka wymywano następnie l 0,01 M Tris-HCl w 0,6 M NaCl (pH 7,3). Następnie, eluat dializowano wobec 12 l wody dl przez 24 godziny dwa razy, a następnie liofilizowano w celu zmniejszenia objętości próbki i zatężenia białek. Filtracja żelowa za pomocą kolumny HiLoad 16/60 Superdex 75 (separacja wielkości). Po adsorpcji DEAE, rozdział wielkości anionowych białek przeprowadzono za pomocą kolumny filtracyjnej HiLoad 16/60 Superdex 75 (Amersham Biosciences), stosując bufor zawierający 0,15 M NaCl i 0,01 M Tris-HCl (pH 7,3) jako bufor roboczy. Continue reading „Identyfikacja ludzkiego współczynnika konduktów 1 z moczem jako nowego inhibitora wzrostu kryształów szczawianu wapnia ad 8”

Wydalanie ludzkiej mitochondrialnej deformylazy peptydowej, nowy cel antyrakowy antybiotyków na bazie aktynoniny ad 7

Ta podgrupa białek komórkowych jest dobrze zdefiniowana; genom mitochondrialny koduje tylko 13 polipeptydów będących podjednostkami różnych kompleksów tworzących łańcuch oddechowy (44, 45). Zatem hamowanie HsPDF w mitochondriach mogłoby prawdopodobnie prowadzić do rozerwania kompleksów białkowych w mitochondrialnym łańcuchu oddechowym i być może nawet do śmierci komórkowej. Hipoteza ta jest zgodna z dowodami na analogiczną rolę odkształcania przez roślinną PDFa białek kodowanych przez chloroplast, które są kluczowymi składnikami fotosystemu II (42). Aktynonina, która powoduje bielenie rośliny, hamuje roślinną PDF, a zatem prowadzi do destabilizacji określonych białek fotosystemu II. Aktywności przeciwbakteryjne i antytylacyjne aktynoniny mogłyby prowadzić do przypuszczenia, że aktynonina hamuje wzrost komórek nowotworowych poprzez hamowanie HsPDF. Continue reading „Wydalanie ludzkiej mitochondrialnej deformylazy peptydowej, nowy cel antyrakowy antybiotyków na bazie aktynoniny ad 7”

Substrat receptora insulinowego 2 odgrywa kluczową rolę w komórki i podwzgórze ad 7

Ekspresja mRNA Irs2 była znacząco zmniejszona zarówno w wysepkach, jak i łukowatym jądrze podwzgórza, ale ekspresja była porównywalna w wątrobie, mięśniach i tkance tłuszczowej myszy. HT-IRS2 i myszy kontrolnych. Konwencjonalne Irs2. /. u myszy wystąpiła otyłość związana z opornością na leptynę (12, 14), wynikającą z atenuacji sygnalizacji leptyny, która występuje przy braku Irs2 w obszarze podwzgórza (18). Continue reading „Substrat receptora insulinowego 2 odgrywa kluczową rolę w komórki i podwzgórze ad 7”

Zwiększony obrót DC do węzłów chłonnych i nadwrażliwość kontaktowa w myszach z niedoborem cząsteczki adhezyjnej A z adhezją ad 8

Królik JAM-B był prezentem Steve a Rosena (University of California, San Francisco, California, USA). Immunoprecypitację i Western blot na ekstraktach komórkowych przeprowadzono w sposób opisany uprzednio. Obciążenie immunologiczne i DC. Nerek myszy, aorty i węzłów chłonnych usunięto, zatopiono w związku OCT Tissue-Tek (Miles Inc.), szybko zamrożono w ciekłym azocie i przechowywano w temperaturze <80 ° C. Zamrożone tkanki następnie dzielono na sekcje o długości 5 urn, utrwalano metanolem przez 10 minut w. Continue reading „Zwiększony obrót DC do węzłów chłonnych i nadwrażliwość kontaktowa w myszach z niedoborem cząsteczki adhezyjnej A z adhezją ad 8”