Kwasy żółciowe obniżają poziom trójglicerydów poprzez szlak obejmujący FXR, SHP i SREBP-1c

Badaliśmy wpływ kwasów żółciowych na homeostazę trójglicerydów (TG) za pomocą kombinacji modeli molekularnych, komórkowych i zwierzęcych. Kwas cholowy (CA) zapobiega gromadzeniu się TG w wątrobie, wydzielaniu VLDL i podwyższonej TG w surowicy w mysich modelach hipertriglicerydemii. Na poziomie molekularnym CA zmniejsza wątrobową ekspresję SREBP-1c i jego docelowych lipogennych genów. Poprzez zastosowanie mutantów myszy dla krótkiego partnera heterodimerycznego (SHP) i receptora X wątroby (LXR). i a, demonstrujemy zasadniczą zależność zmniejszenia ekspresji SREBP-1c przez agonistów zarówno naturalnego, jak i syntetycznego farnezoidu X receptora (FXR) zarówno na SHP, jak i na LXR. Continue reading „Kwasy żółciowe obniżają poziom trójglicerydów poprzez szlak obejmujący FXR, SHP i SREBP-1c”

Rola limfotoksyny powierzchniowej w eksperymentalnym autoimmunologicznym zapaleniu mózgu i rdzenia niezależna od LIGHT czesc 4

Częstotliwość limfocytów T 11,11 została określona dla każdej myszy biorcy przez barwienie znakowanym PE KJ126 (Caltag Laboratories Inc.). Komórki T z DO11.10 barwiono również Abs na CD69 i CD25 (PharMingen). Testy proliferacji komórek T. W celu oceny odpowiedzi komórek T w modelu EAE szczura, odwadniające LNP pachwinowe zebrano ze wszystkich grup leczenia w dniu 7 i 10 przebiegu choroby. Komórki T CD4 + oczyszczono przez negatywną selekcję z dysocjowanych komórek LN przez przepuszczenie ich przez szczurzą kolumnę do odzyskiwania komórek CD4, zgodnie ze specyfikacją producenta (Cedarlane Laboratories Inc.). Continue reading „Rola limfotoksyny powierzchniowej w eksperymentalnym autoimmunologicznym zapaleniu mózgu i rdzenia niezależna od LIGHT czesc 4”

Brodawka nerek jest niszą dla komórek macierzystych nerki dorosłych ad 8

Rzeczywiście, kwantyfikacja komórek macierzystych w brodawce nerkowej będzie wymagać ich izolacji i identyfikacji przy użyciu metod, które ich nie uszkadzają (np. Swoiste markery powierzchni komórki). Ogromna wiedza na temat hematopoetycznych komórek macierzystych zdominowała intelektualny krajobraz dojrzałych narządów macierzystych dorosłych. Chociaż w szpiku kostnym pojedyncza komórka wytwarza wszystkie składniki komórkowe krwi krążącej, wydaje się mało prawdopodobne, aby dorosłe komórki macierzyste nerki mogły wygenerować kompletny nefron de novo. W narządach stałych o złożonych strukturach, takich jak nerka, wydaje się bardziej prawdopodobne, że dorosłe komórki macierzyste mają bardziej ograniczoną zdolność generatywną i że ich funkcja może być ograniczona do zastąpienia izolowanych umieralnych komórek podczas konserwacji narządu lub po naprawie szkody. Continue reading „Brodawka nerek jest niszą dla komórek macierzystych nerki dorosłych ad 8”

Zwiększony obrót DC do węzłów chłonnych i nadwrażliwość kontaktowa w myszach z niedoborem cząsteczki adhezyjnej A z adhezją ad 8

Królik JAM-B był prezentem Steve a Rosena (University of California, San Francisco, California, USA). Immunoprecypitację i Western blot na ekstraktach komórkowych przeprowadzono w sposób opisany uprzednio. Obciążenie immunologiczne i DC. Nerek myszy, aorty i węzłów chłonnych usunięto, zatopiono w związku OCT Tissue-Tek (Miles Inc.), szybko zamrożono w ciekłym azocie i przechowywano w temperaturze <80 ° C. Zamrożone tkanki następnie dzielono na sekcje o długości 5 urn, utrwalano metanolem przez 10 minut w. Continue reading „Zwiększony obrót DC do węzłów chłonnych i nadwrażliwość kontaktowa w myszach z niedoborem cząsteczki adhezyjnej A z adhezją ad 8”

Substrat receptora insulinowego 2 odgrywa kluczową rolę w komórki i podwzgórze ad 7

Ekspresja mRNA Irs2 była znacząco zmniejszona zarówno w wysepkach, jak i łukowatym jądrze podwzgórza, ale ekspresja była porównywalna w wątrobie, mięśniach i tkance tłuszczowej myszy. HT-IRS2 i myszy kontrolnych. Konwencjonalne Irs2. /. u myszy wystąpiła otyłość związana z opornością na leptynę (12, 14), wynikającą z atenuacji sygnalizacji leptyny, która występuje przy braku Irs2 w obszarze podwzgórza (18). Continue reading „Substrat receptora insulinowego 2 odgrywa kluczową rolę w komórki i podwzgórze ad 7”

Wydalanie ludzkiej mitochondrialnej deformylazy peptydowej, nowy cel antyrakowy antybiotyków na bazie aktynoniny ad 7

Ta podgrupa białek komórkowych jest dobrze zdefiniowana; genom mitochondrialny koduje tylko 13 polipeptydów będących podjednostkami różnych kompleksów tworzących łańcuch oddechowy (44, 45). Zatem hamowanie HsPDF w mitochondriach mogłoby prawdopodobnie prowadzić do rozerwania kompleksów białkowych w mitochondrialnym łańcuchu oddechowym i być może nawet do śmierci komórkowej. Hipoteza ta jest zgodna z dowodami na analogiczną rolę odkształcania przez roślinną PDFa białek kodowanych przez chloroplast, które są kluczowymi składnikami fotosystemu II (42). Aktynonina, która powoduje bielenie rośliny, hamuje roślinną PDF, a zatem prowadzi do destabilizacji określonych białek fotosystemu II. Aktywności przeciwbakteryjne i antytylacyjne aktynoniny mogłyby prowadzić do przypuszczenia, że aktynonina hamuje wzrost komórek nowotworowych poprzez hamowanie HsPDF. Continue reading „Wydalanie ludzkiej mitochondrialnej deformylazy peptydowej, nowy cel antyrakowy antybiotyków na bazie aktynoniny ad 7”

Identyfikacja ludzkiego współczynnika konduktów 1 z moczem jako nowego inhibitora wzrostu kryształów szczawianu wapnia ad 8

Zawiesinę przesączono przez filtr ze spiekanego szkła i placek przemyto 0,01 M Tris-HCl w 0,05 M NaCl (pH 7,3), aż przesącz stał się bezbarwny. Zaadsorbowane białka wymywano następnie l 0,01 M Tris-HCl w 0,6 M NaCl (pH 7,3). Następnie, eluat dializowano wobec 12 l wody dl przez 24 godziny dwa razy, a następnie liofilizowano w celu zmniejszenia objętości próbki i zatężenia białek. Filtracja żelowa za pomocą kolumny HiLoad 16/60 Superdex 75 (separacja wielkości). Po adsorpcji DEAE, rozdział wielkości anionowych białek przeprowadzono za pomocą kolumny filtracyjnej HiLoad 16/60 Superdex 75 (Amersham Biosciences), stosując bufor zawierający 0,15 M NaCl i 0,01 M Tris-HCl (pH 7,3) jako bufor roboczy. Continue reading „Identyfikacja ludzkiego współczynnika konduktów 1 z moczem jako nowego inhibitora wzrostu kryształów szczawianu wapnia ad 8”

Identyfikacja ludzkiego współczynnika konduktów 1 z moczem jako nowego inhibitora wzrostu kryształów szczawianu wapnia

Wcześniejsze badania nad białkami, które hamują tworzenie się kamieni nerkowych, wykazały stosunkowo niewielką liczbę dobrze scharakteryzowanych inhibitorów. Identyfikacja dodatkowych inhibitorów kamiennych zwiększyłaby zrozumienie patogenezy i patofizjologii kamicy nerkowej. Połączyliśmy konwencjonalne metody biochemiczne z ostatnimi postępami w dziedzinie spektrometrii mas (MS) w celu zidentyfikowania nowego inhibitora wzrostu kryształów szczawianu wapnia (CaOx) w normalnym ludzkim moczu. Anionowe białka wyizolowano przez adsorpcję DEAE i rozdzielono przez filtrację żelu HiLoad 16/60 Superdex 75. Frakcję o silnej aktywności hamującej wzrost kryształów CaOx wyizolowano i oczyszczono metodą chromatografii anionowymiennej. Continue reading „Identyfikacja ludzkiego współczynnika konduktów 1 z moczem jako nowego inhibitora wzrostu kryształów szczawianu wapnia”

Wprowadzenie wirusa paragrypy do komórek jako cel przerywania choroby układu oddechowego u dzieci ad 5

Białka HN o zwiększonym powinowactwie do receptora lub o zmniejszonej aktywności enzymatycznej (rozszczepianie receptorów) pozostają w stanie związanym z ich receptorem dłużej niż białka HN WT. Zarówno aktywność wiązania z receptorem na powierzchni komórki, jak i aktywność neuraminidazy białka HN, poprzez wpływ na czas trwania oddziaływania receptora HN, regulują aktywację białka F i promocję fuzji. Intrygujący zmutowany wirus to taki, który zawiera zmianę (P111S) w regionie trzonu cząsteczki HN wraz z globularną mutacją głowy, która zmniejsza aktywność neuraminidazy. Podczas gdy wirusy z tą cząsteczką HN są rzeczywiście pozbawione neuraminidazy, są wadliwe w promowaniu fuzji komórek, w przeciwieństwie do tego, co można przewidzieć (30). Było to pierwsze wskazanie, że istnieje oddzielna funkcja białka HN, która specyficznie wyzwala białko F i że znajduje się w regionie łodygi białka. Continue reading „Wprowadzenie wirusa paragrypy do komórek jako cel przerywania choroby układu oddechowego u dzieci ad 5”

Nadciśnienie z docelowej ablacji chromograniny A może zostać uratowane przez ortologa człowieka ad 8

Wyizolowaliśmy 2 nachodzące na siebie mysie klony genomowe Chga z biblioteki izogenicznej (mysi szczep 129 / Sv) genomowego DNA (w faga lambda-FIX [Stratagene], z Instytutu Burnhama, La Jolla, Kalifornia, USA). Trzy ramiona izogenicznego genomowego DNA Chga wstawiono do wektora pFlox (Figura 1). Komórki ES (szczep CJ7, pochodzący od myszy 129 / Sv) transfekowano 40 .l liniowego konstruktu kierującego przez elektroporację (450 V, 250 .F). Po początkowej selekcji wybrano pojedynczą (pozytywną) selekcje aminoglikozydu G-418 (genetyna, 0,3 mg / ml), 192 dodatnie (to znaczy oporne na G-418a) i sklonowano. Przeszukiwanie pozytywnego klonu przeprowadzono za pomocą analizy Southern blot. Continue reading „Nadciśnienie z docelowej ablacji chromograniny A może zostać uratowane przez ortologa człowieka ad 8”