Kwasy żółciowe obniżają poziom trójglicerydów poprzez szlak obejmujący FXR, SHP i SREBP-1c cd

Każda studzienka zawierała 64 ng reportera lucyferazy i 4 ng plazmidu ekspresyjnego P-galaktozydazy. Gdy wskazano, transfekowaliśmy 16 ng RXRa, 16 ng LXRa, 16 ng LRH-1, 32 ng plazmidu ekspresyjnego SHP lub odpowiadających im pustych wektorów ekspresyjnych. Po 6 godzinach inkubacji z kompleksami DNA-lipofektaminy, pożywkę transfekcyjną wymieniono na pożywkę z lub bez wskazanych ligandów. Ligandy dla LXR i RXR rozpuszczono w etanolu lub DMSO i dodano do komórek w DMEM uzupełnionym 10% surowicą z niedoborem lipoprotein. Aby zahamować aktywację SREBP-1c przez przetwarzanie, prowadząc do indukcji sprzężonej ekspresji SREBP-1c, pożywka stosowana w badaniu promotora SREBP-1c była również uzupełniona 10 .g / ml cholesterolu i .g / ml 25-hydroksycholesterolu. Continue reading „Kwasy żółciowe obniżają poziom trójglicerydów poprzez szlak obejmujący FXR, SHP i SREBP-1c cd”

Rola limfotoksyny powierzchniowej w eksperymentalnym autoimmunologicznym zapaleniu mózgu i rdzenia niezależna od LIGHT ad 6

Dlatego sygnalizacja LT ma kluczowe znaczenie dla patogenezy OUN w tym modelu EAE, a LIGHT nie może zrekompensować braku sygnalizacji pośredniczonej przez LTp / P-. Traktowanie LT-R-Ig in vivo skutkuje zaburzeniami odpowiedzi limfocytów T ex vivo. Ponieważ szczurzy model EAE jest w przeważającej mierze kierowany komórkami T (27, 28), chcieliśmy ustalić, czy traktowanie LT. R-Ig in vivo powoduje defekty komórek T mierzone ex vivo. Odpowiednio, limfocyty T CD4 + z pachwinowych LN opróżniających miejsce immunizacji izolowano w dniu 10 przebiegu choroby. Continue reading „Rola limfotoksyny powierzchniowej w eksperymentalnym autoimmunologicznym zapaleniu mózgu i rdzenia niezależna od LIGHT ad 6”

Brodawka nerek jest niszą dla komórek macierzystych nerki dorosłych ad 10

Ponadto, zdolność nerki do odzyskania funkcji po długotrwałym niedokrwieniu może być spowodowana opornością brodawki na uszkodzenie niedokrwienne. Podobnie, podawanie związków nefrotoksycznych, takich jak chlorek rtęci, który indukuje przemijającą ostrą niewydolność nerek, jest związane z wyraźnymi zmianami morfologicznymi w brodawki nerkowej, ale te zmiany sugerują zwiększoną aktywność komórkową, a nie uszkodzenie komórek (45). Metody BrdU ładowanie szczurów i myszy. Aby uzyskać zwierzęta z komórkami utrzymującymi BrdU, 3-dniowym szczurom Sprague-Dawley i myszom CD podawano podskórnie 50 .g / g BrdU (Sigma-Aldrich) dwa razy dziennie przez 3,5 dnia. Następnie zwierzętom pozwolono rosnąć, a ich nerki zbierano począwszy od 2 miesiąca życia. Continue reading „Brodawka nerek jest niszą dla komórek macierzystych nerki dorosłych ad 10”

Brodawka nerek jest niszą dla komórek macierzystych nerki dorosłych ad

BrdU jest włączany do DNA podczas fazy S cyklu komórkowego, ale w czasie łańcucha, dalsza synteza DNA w nieobecności otaczającego BrdU coraz bardziej rozcieńcza znacznik w komórkach potomnych. Stąd intensywność etykiety w jądrze komórkowym jest wskaźnikiem liczby podziałów komórkowych, które wystąpiły od czasu podania BrdU, przy czym najjaśniejsze komórki to te z najniższą liczbą podziałów. Do wykrycia komórek znakowanych BrdU użyto mikroskopii immunofluorescencyjnej. Standardowe odcinki nerki o grubości 5 .m bardzo rzadko zawierały jakiekolwiek komórki pozytywne dla BrdU, z wyjątkiem brodawki nerkowej, gdzie wykryto niektóre komórki (nie pokazano), ale bardziej szczegółowe badanie komórek zatrzymujących znacznik było możliwe na odcinkach 100. m w grubości. Continue reading „Brodawka nerek jest niszą dla komórek macierzystych nerki dorosłych ad”

Substrat receptora insulinowego 2 odgrywa kluczową rolę w komórki i podwzgórze ad 9

Porównawczą analizę poziomów mRNA w różnych tkankach przeprowadzono za pomocą RT-PCR. Całkowity RNA traktowano DNazą wolną od RNazy (Nippon Gene Co.) i cDNA pierwszej nici wytworzono z losowymi 9-merowymi starterami i odwrotną transkryptazą (Takara Shuzo Co.). Mieszaninę odwrotnej transkrypcji amplifikowano specyficznymi starterami. Primery dla rekombinazy Cre były takie, jak opisano powyżej. Startery dla Irs2 były 5-GGTGCTAAGGTCATCCGTGCA-3. Continue reading „Substrat receptora insulinowego 2 odgrywa kluczową rolę w komórki i podwzgórze ad 9”

Wydalanie ludzkiej mitochondrialnej deformylazy peptydowej, nowy cel antyrakowy antybiotyków na bazie aktynoniny ad 9

SiRNA specyficzne dla ludzkiego Pdf (National Center for Biotechnology Information [NCBI] nr dostępu NM_022341) zostały umieszczone na 581. 601 i 659. 679 względem kodonu start i zostały porównane z sekwencjami w bazie danych ludzkiego genomu, aby potwierdzić, że nie inne geny były celem. Niespecyficzną pulę kontrolną dupleksu (Dharmacon Inc.) zastosowano jako kontrolę i złożono z 4 dupleksów zawierających 33% zawartości GC. Wszystkie eksperymenty przeprowadzono dwukrotnie, w trzech powtórzeniach za każdym razem. Continue reading „Wydalanie ludzkiej mitochondrialnej deformylazy peptydowej, nowy cel antyrakowy antybiotyków na bazie aktynoniny ad 9”

Wydalanie ludzkiej mitochondrialnej deformylazy peptydowej, nowy cel antyrakowy antybiotyków na bazie aktynoniny

Wydaje się, że aktywność odkształcalnej peptydazy ogranicza się do syntezy białek rybosomalnych u organizmów prokariotycznych, gdzie nowe peptydy są inicjowane za pomocą N-formylowanej metioniny. Opisujemy tu nową ludzką deformazę peptydu (Homo sapiens PDF lub HsPDF), która jest zlokalizowana w mitochondriach. HsPDF jest zdolny do usuwania grup formylowych z N-końcowych metionin nowo zsyntetyzowanych białek mitochondrialnych, aktywności wcześniej nie uważanej za niezbędną w komórkach ssaczych. Pokazujemy, że aktynonina, peptydomimetyczny antybiotyk, który hamuje HsPDF, hamuje również proliferację 16 ludzkich linii komórek rakowych. Zaprojektowaliśmy i zsyntetyzowaliśmy 33 chemiczne analogi aktynoniny; wszystkie cząsteczki o silnej aktywności przeciwko HsPDF również hamowały wzrost komórek nowotworowych i na odwrót, potwierdzając swoistość docelową. Continue reading „Wydalanie ludzkiej mitochondrialnej deformylazy peptydowej, nowy cel antyrakowy antybiotyków na bazie aktynoniny”

Identyfikacja ludzkiego współczynnika konduktów 1 z moczem jako nowego inhibitora wzrostu kryształów szczawianu wapnia cd

Tą połączoną frakcję następnie oddzielono przez chromatografię anionowymienną Q z Wymianą z gradientem 0. 0,5 M NaCl (rozdział ładunku). Frakcję X oddzielono dalej przez chromatografię anionowymienną na kolumnie Resource Q. Związane białka eluowano liniowym gradientem 0. 0,5 M NaCl. Continue reading „Identyfikacja ludzkiego współczynnika konduktów 1 z moczem jako nowego inhibitora wzrostu kryształów szczawianu wapnia cd”

Wprowadzenie wirusa paragrypy do komórek jako cel przerywania choroby układu oddechowego u dzieci ad 7

Struktura krystaliczna 3D białka HN ptasiego paramyksowirusa NDV (20) sugeruje, że jedno miejsce może prowadzić zarówno aktywność wiążącą, jak i neuraminidazę, ale naukowcy postulują, że istnieje dodatkowe miejsce wiążące receptor HN (21), jeden wykazujący enzym i aktywność wiązania receptora, a druga wykazuje tylko aktywność wiązania receptora (46). W NDV, podobnie jak w HPIV3, 4-GU-DANA znacznie zmniejsza infekcję. Jednak w przypadku HPIV3 jest to efekt pośredniczony przez blokowanie wirusowego wejścia do komórki gospodarza, podczas gdy w przypadku NDV wiązanie białka HN z jego receptorem jest oporne na działanie hamujące 4-GU -DANA, co sugeruje, że niepowodzenie uwolnienia wirionów potomnych z powodu hamowania neuraminidazy przez 4-GU-DANA odpowiada za zmniejszoną infekcyjność dla NDV (46). Tak więc, nawet 2 podobne paramyksowirusy zachowują się zupełnie inaczej pod względem ich odpowiedzi na inhibitory analogów receptora, co stanowi centralne miejsce w dyskusji na temat podejść antywirusowych (omówionych poniżej). Dostępność struktury krystalicznej białka HPIV3 HN i dane z naszych zmutowanych badań białka HN pozwoliły na dokonanie kilku korelacji między strukturą i funkcją HN HPIV3. Continue reading „Wprowadzenie wirusa paragrypy do komórek jako cel przerywania choroby układu oddechowego u dzieci ad 7”

Nadciśnienie z docelowej ablacji chromograniny A może zostać uratowane przez ortologa człowieka ad 10

Całkowitą objętość wydzielniczych granulek obliczono następnie przez pomnożenie jego gęstości objętościowej przez objętość cytoplazmatyczną komórek chromatyny. Gęstość liczbową wydzielniczych granulek określono zgodnie z nieobciążoną zasadą dwuwymiarową (59) przez policzenie liczby granulek w obszarze odniesienia obejmującym 10. M2 cytoplazmy komórek chromatyny, po nałożeniu przezroczystej nakładki z siatką kratową na elektron. mikrografie komórek. Zostały policzone tylko profile granulek przecięte krawędziami inkluzji (górną i prawą ramką) oraz wewnątrz ramki. Continue reading „Nadciśnienie z docelowej ablacji chromograniny A może zostać uratowane przez ortologa człowieka ad 10”