Rola limfotoksyny powierzchniowej w eksperymentalnym autoimmunologicznym zapaleniu mózgu i rdzenia niezależna od LIGHT ad 8

Eksperyment przeprowadzono również w dniu 10 i dniu 39 z podobnymi wynikami. Aby zbadać, czy wpływ na komórki T odpowiada zapobieganiu stanom zapalnym i demielinizacji w tkance docelowej, ustalono odcinki szyjne, grzbietowe i odcinek lędźwiowy rdzenia kręgowego R-EAE i zbadano histologicznie pod kątem infiltracji leukocytów i barwienia LFB w celu demielinizacji. W porównaniu z rdzeniowymi rdzeniami nieimmunizowanych myszy SJL (Figura 5, a (3d), rdzenie kręgowe od dnia 59, immunizowane myszy leczone kontrolnym wykazują dowody na nacieki leukocytów zarówno w istocie białej, jak i szarej (Figura 6, e i g). Odpowiadające tym miejscom nacieku leukocytów, istnieją poważne luki w barwieniu LFB, które identyfikuje mielinę zlokalizowaną w istocie białej OUN (Figura 6, f i h). Przeciwnie, badanie rdzeni kręgowych z myszy R-EAE traktowanych LT-R-Ig (3 wykazało bardzo małą infiltrację leukocytów (Figura 6, i i k) i minimalną degradację mieliny (Figura 6, j i 1). W związku z tym nie obserwuje się stanu zapalnego i demielinizacji podczas okresu nawrotu w modelu myszy LT-R-EAE R-EAE. Figura 6Infekcje są wykrywane w OUN u myszy EAE z 59 dniem w kontrolnych IgG, ale nie u myszy leczonych LTYR-Igp. Infiltrację i demielinizację porównano między nieleczonymi myszami SJL nieleczonymi a kontrolnymi myszami SJL traktowanymi huIgG lub LTA-Igh immunizowanymi PLP139a1 151 (dzień 59), jak wskazano. Naprawiono rdzeń kręgowy z zatopionymi w parafinie odcinkami stycznie (a, b, e, f, i, j) i podłużnie (c, d, g, h, k, l), barwiono H & E (a, c, e , g, i, k) lub z LFB do oceny degradacji mieliny (b, d, f, h, j, l) i wizualizowane przy x 50 za pomocą mikroskopu Leica. Przedstawiono reprezentatywne sekcje z pięciu zwierząt. Podobne wyniki uzyskano w 39 dniu po immunizacji. Traktowanie LT-R-Ig nie wpływa na ekspansję in vivo komórek T specyficznych wobec Ag; jednak kolejne odpowiedzi ex vivo na Ag są zmniejszone. Biorąc pod uwagę, że limfocyty T ze szczurów traktowanych LTYR-lgp są niedoczynne w odpowiedzi na peptyd MBP ex vivo, jedną z możliwości jest to, że przy hamowaniu LT nie występuje inicjowanie in vivo komórek T. Podejrzewaliśmy, że tak nie było, ponieważ na fazę ostrą w R-EAE nie wpłynęło leczenie LT-R-Ig. Do śledzenia klonów limfocytów T specyficznych dla Ag in vivo używaliśmy układu transgenicznego T BALB / c-DO11.10 (25). W tym układzie transgeniczne komórki T CD4 + specyficzne dla OVA323-339a są przenoszone do biorców BALB / c, które są następnie immunizowane OVA323. 339. Ponieważ badane przez nas modele EAE wymagają adiuwanta CFA, podobnie immunizowano biorców BALB / c OVA323. 339 emulgowanych w CFA. Odbiorcy BALB / c wstępnie traktowano LT-R-Ig lub białkiem kontrolnym przed transferem komórek T i immunizacją. Ekspansję klonów komórek T CD4 + specyficznych dla OVA323 339p monitorowano następnie za pomocą FACS z użyciem klonuotypowego Ab KJ126. Jako zwierzęta kontrolne, zwierzęta otrzymywały komórki T KJ126 +, ale nie były immunizowane OVA323. 339. Zwierzęta te wykazywały stały poziom limfocytów T KJ126 + w LN w czasie trwania eksperymentu, niezależnie od tego, czy były nietraktowane (Figura 7a), czy traktowane LT (3-Ig (dane nie przedstawione). Przeciwnie, komórki T KJ126 + CD4 + przeniesione do myszy BALB / c leczonych kontrolną immunizowaną OVA323 ~ 339a CFA ekspandowały in vivo jako procent ogólnych limfocytów T CD4 +. Chociaż hamowanie szlaku LT powodowało defekty odpowiedzi limfocytów T CD4 + na peptydy MBP i PLP ex vivo, nie widzieliśmy oznak osłabionej ekspansji klonalnej specyficznych wobec Ag limfocytów T DO11.10 in vivo w odniesieniu do procentu limfocytów T CD4 +. były to KJ126 + (rysunek 7a). Liczba limfocytów T KJ126 + we wszystkich czterech drenujących LN była również podobna w grupie kontrolnej huIgG w porównaniu z grupą leczoną LT (3-Ig (4,0 x 105 w porównaniu z 5,7 x 105 w dniu 5, P = 0,1 i 4,4 x 105 w porównaniu do 3,0 x 105 w dniu 7, P = 0,15). Klonowa ekspansja limfocytów T DO11.10 u pacjentów leczonych LT-R-Igp nie była po prostu spowodowana małą populacją komórek proliferujących, ponieważ komórki T DO1.10 znakowane CFSE wykazywały z czasem utratę etykiety CFSE, która była porównywalna z tą obserwowane u osób otrzymujących kontrolę (Ryc. 7, b, panel środkowy a panel dolny). Na tej figurze komórki KJ126 + porównuje się do znakowania CFSE w dniu 5 po immunizacji. W 7 dniu po immunizacji utracono znaczną część etykiety CFSE (danych nie pokazano). Ponadto, przejściową ekspresję CD69 markera aktywacji komórek T obserwowano na komórkach T DO11.10 od myszy otrzymujących huIgG i LTyR-Igp (dane nie pokazane)
[więcej w: błonnik witalny opinie lekarzy, makijaz permanentny cena, jak przygotować bakłażana ]
[hasła pokrewne: szczepienie dur brzuszny, makijaz permanentny cena, leczenie zębów w narkozie ]
[hasła pokrewne: szczepienie dur brzuszny, makijaz permanentny cena, leczenie zębów w narkozie ]