Rola limfotoksyny powierzchniowej w eksperymentalnym autoimmunologicznym zapaleniu mózgu i rdzenia niezależna od LIGHT ad 7

Procent CD4 + (b) i CD8 + (c) dla wszystkich komórek w bramce wielkości limfoidalnej był porównywany pomiędzy grupami terapeutycznymi, w których szczury kontrolne były naiwne i nieleczone. Pokazano średnie i standardowe odchylenie pięciu oddzielnych zwierząt na grupę. Rdzenie kręgowe również zebrano, utrwalono, styczne odcinki parafiny barwiono H & E i wizualizowano przy x 50 (d, f, h) lub x 400 (e, g, i) za pomocą mikroskopu Leica. Nieimmunizowane naiwne szczury (d i e) porównano ze szczurami kontrolnymi huIgGp (f i g) lub szczurami traktowanymi LT (3-Ig (h i i). Eksperymenty przeprowadzono dwukrotnie z podobnymi wynikami. Hamowanie szlaku LT zapobiega nawrotom u myszy SJL, ale nie ma wpływu na fazę ostrą. Oprócz jednofazowego modelu szczurzego EAE, ważna była ocena skuteczności LT. R-Ig w postaci nawrotowej EAE, która podobnie nie wymaga podawania PTx. R-EAE to model demielinizacyjny, w którym pośredniczy CD4 Th1 indukowany u myszy wrażliwych na SJL przez immunizację PLP139a115 w CFA. Ten schemat powoduje ostrą fazę choroby, która osiąga wartości szczytowe pomiędzy dniem 16 a 18 i ustępuje do dnia 20, a następnie nawroty, które występują do 25 dnia. Dlatego myszy SJL wstrzyknięto dzień przed immunizacją, a następnie co tydzień, LT. R-Ig (mysia wersja IgG-1) lub kontrolne dopasowanie mysiego białka IgG-1 (MOPC21). Oceny chorobowe przedstawiono na rycinie 4 jako średnie dla całej kohorty. Ponieważ nawroty występują w różnych punktach czasowych od myszy do myszy, fazę nawrotu, która następuje po 25 dniu, wizualizuje się jako utrzymującą się chorobę. Badanie częstości występowania choroby, maksymalnego wyniku i dnia największego wyniku ostrej fazy nie wykazało różnic między grupami traktowanymi MOPC21 i LT (3-Ig (Tabela 1, Figura 4a). Po 25 dniu przebiegu choroby nastąpiło jednak znaczne zmniejszenie częstości nawrotów choroby za pomocą leczenia LT (3-Ig (P <0,001) (Tabela 1, Figura 4b). Dlatego LT-R-Ig jest skuteczny w zapobieganiu nawrotom choroby w modelu SJL EAE. Rycinie 4, ale nie ostrej chorobie, zapobiega się przez traktowanie LT. R-Ig w chronicznym mysim modelu EAE. Myszy SJL traktowano kontrolnymi huIgG (romby) lub LT (3-Ig (kółka) na dzień przed immunizacją PLP139a151 w CFA. Porażenie kończyn oceniano we wszystkich fazach choroby i jest tutaj reprezentowane jako średni wynik w kohorcie (a), a częstość nawrotu mierzono począwszy od dnia 20 (b). Eksperyment przeprowadzono na 32 zwierzętach na grupę i przeprowadzono dwukrotnie z podobnymi wynikami. Tabela Pomierzone parametry traktowania LT-R-EAE LTaR-Ig myszy R-EAE powodują hiporeaktywność limfocytów T ex vivo. Proliferację indukowaną przez Ag i wydzielanie cytokin mierzono ex vivo w celu określenia, czy skuteczność obserwowana przy traktowaniu LT-R-Ig w modelu R-EAE była spowodowana wpływem na różnicowanie komórek Th. Podczas ostrej fazy przebiegu choroby R-EAE izolowano odwadnianie LN i wysiano komórki LN o różnych stężeniach PLP139a115. Nieoczekiwanie, nawet jeśli na ostrą fazę choroby nie ma wpływu terapia LT. R-Ig, proliferacja komórek T i IFN-y. wytwarzanie w teście reakcji na wycofanie z PLP 139391 ex vivo jest upośledzone (Figura 5, odpowiednio, aib, w dniu 7). Podobne wyniki uzyskano, jeśli komórki LN wyizolowano od myszy z 10-dniowym R-EAE (dane nie pokazane). W celu oceny odpowiedzi limfocytów T podczas fazy nawrotu, w dniu 59 przebiegu choroby R-EAE, splenocyty z obu myszy SJL traktowanych MOPC21 traktowanych MOPC21 i myszy SJL traktowanych LT (3-Ig-lz wysiewano przy różnych stężeniach PLP139a1 151 (w późniejszych punktach czasowych R-EAE, reaktywność PLP139. 151 nie jest już wykrywana w drenujących węzłach pachwinowych). Splenocyty z myszy R-EAE traktowanych kontrolną odpowiedziały na PLP139a151 w sposób zależny od dawki (Figura 5c, diamenty) i wydzielany IFN-y. (Figura 5d); jednakże, splenocyty z myszy R-EAE traktowanych LT (3-Ig-l były oporne na proliferację, w której pośredniczy PLP139 p-151 (Figura 5c, otwarte kółka) i nie wydzielały IFN-y. (Figura 5d). Dlatego leczenie skutkuje zaburzeniami odpowiedzi limfocytów T ex vivo zarówno podczas ostrej, jak i nawrotowej fazy choroby; jednak tylko w okresie nawrotu leczenie jest skuteczne w zmniejszaniu punktacji klinicznej. Figura 5 Traktat lL-R-Ig upośledza reakcje przywracania komórek T do PLP139a151. (a) W dniu 7 po immunizacji PLP139a151 myszami SJL wyizolowano połączone komórki LN z myszy huIgG kontrolowanych huIgG (romby) i LT. R-Ig. (kółka), stymulowano in vitro PLP139. 151 i proliferacją. zmierzono przez wychwyt 3H-tymidyny. (b) Supernatanty z hodowli w (0 i 10 .g / ml PLP139a11,1, odpowiednio białe i szare słupki) zebrano po 72 godzinach i zmierzono metodą ELISA dla IFN-y. zawartość [hasła pokrewne: dlaczego ziewanie jest zaraźliwe, rezonans magnetyczny otwarty warszawa, szczepienie dur brzuszny ] [patrz też: laboratorium pruszcz gdański, barszcz czerwony magdy gessler, rezonans magnetyczny puławy ] [hasła pokrewne: laboratorium pruszcz gdański, barszcz czerwony magdy gessler, rezonans magnetyczny puławy ]