Mucyna komórkowa MUC1 jest krytycznym elementem bariery śluzówkowej dla infekcji ad

Ekspresja żołądkowo-jelitowa Muc1 zmienia się gwałtownie w odpowiedzi na zakażenie. Rozrost komórek kubkowych i zwiększone uwalnianie wydzielanych mucyn są dobrze scharakteryzowanymi odpowiedziami na zakażenie śluzówki. Dla porównania niewiele wiadomo o regulacji mucyn powierzchni komórki w odpowiedzi na infekcję. W związku z tym określiliśmy ekspresję Muc1 w tkankach przewodu pokarmowego myszy zakażonych doustnie bakteryjnym patogenem C. jejuni (patrz Figura i Suplementowa Figura 1, materiał uzupełniający dostępny online w tym artykule; doi: 10.1172 / JCI26705DS1). W prawidłowym żołądku Muc1 był obecny na powierzchni błony komórkowej w głębszych komórkach żołądka i na powierzchni nabłonka. Barwne barwienie cytoplazmatyczne obserwowano w komórkach gruczołów mlecznych i sercowych, słabe wybarwienie cytoplazmatyczne w komórkach śluzu nabłonka powierzchniowego i tylko bardzo słabe zabarwienie wydzielanego materiału. Dla porównania, w jelicie cienkim, jelicie ślepym i jelicie grubym zaobserwowano tylko bardzo słabe sporadyczne barwienie Muc1. Figura Ekspresja jelita w przewodzie pokarmowym Muc1 jest szybko regulowana w górę w odpowiedzi na zakażenie C. jejuni. Ekspresję muc1 określono przez immunohistochemię z przeciwciałem z domeny cytoplazmatycznej CT2 w żołądku, jelicie cienkim i jelicie grubym niezakażonych myszy Muc1 + / + (kontrola) i myszy zakażonych 104C. jejuni przez 2, 6 i 24 godziny. Ocenę odsetka zabarwienia komórek i intensywności barwienia dla gruczołów głębokich lub nabłonka powierzchniowego (nabłonek kosmków w jelicie cienkim) wykonano ślepo na leczenie. Przykłady barwienia w każdym punkcie czasowym podano na Uzupełniającej Figurze 1. Nie obserwowano barwienia w niezakażonym lub zakażonym Muc1. /. myszy. Po infekcji nastąpił gwałtowny wzrost odsetka komórek, które były pozytywne i intensywność wybarwiania Muc1 (patrz Figura i Suplementowa Figura 1). W żołądku obserwowano wzrost powierzchni komórkowej i cytoplazmatycznego Muc1 na powierzchni światła od 2 godzin po inokulacji i osiągając szczyt 1-2 dni później. Muc1 wykryto również za pomocą immunohistochemii w wydzielinach w świetle płuc u zakażonych myszy, zgodnie z bezpośrednim wydzielaniem lub wydalaniem mucyny w odpowiedzi na infekcję. W jelicie cienkim silna indukcja ekspresji Muc1 była ograniczona do izolowanych skupisk komórek w nabłonku kosmków 2. 24 godziny po infekcji (patrz Figura i Suplementowa Figura 1). Miejsca, w których wydawało się, że komórki nabłonkowe zostały zrzucone lub wyodrębnione, zaobserwowano u z 4, z 4 i 3 z 4 myszy po 2, 6 i 24 godzinach, odpowiednio. Po 6 i 24 godzinach wszystkie te miejsca wykazywały ponad 75% komórek eksprymujących Muc1, z intensywnością barwienia ocenianą na 2 lub 3. Obrażenia i ogniska intensywnego barwienia Muc1 nie obserwowano u niezakażonych myszy. W jelicie ślepym i jelicie grubym barwienie cytoplazmatyczne komórek nabłonka powierzchniowego znacznie wzrosło po 6 godzinach od zakażenia i utrzymywało się przez 2 dni (patrz Figura i Dodatkowa Figura 1). C. jejuni przylega do mysich mucyn. W ograniczonej liczbie badań zbadano przyleganie C. jejuni i chemotaksję do mucyn (17, 18). Nie ma jednak opublikowanych badań dotyczących mucin jelitowych myszy, a oligosacharydy mucynowe mogą się różnić między gatunkami. Wykazujemy teraz przyleganie C. jejuni do mysiego wydzieliny mucy jelitowej Muc2. Co ważne, wiązanie z Muc2 było zależne od pH, z wiązaniem najwyższego w pH 5,5. 6,0 jelita (patrz Figura 2, A i B). Desialilacja mucyny przez neuraminidazę zwiększyła wiązanie C. jejuni i wyeliminowała wpływ pH (patrz Figura 2B). Dane te sugerują, że istnieją co najmniej 2 różne ligandy oligosacharydowe mucyny dla C. jejuni na mysiej mucynie: sialilowany oligosacharyd związany przez adhezynę o wpływie pH i niejonizowana struktura związana adherentną niezawierającą pH. Użyliśmy syntetycznych oligosacharydów sprzężonych z ludzką albuminą surowicy, aby wykazać nieistotne wiązanie C. jejuni ze strukturami Lewis-b (Leb) i sialil-Lewis-x (sialil-Lex) związanymi przez pokrewne bakterie wiążące mucynę Helicobacter pylori i silne wiązanie do struktury H typu 2 obecnej na mucynach żołądkowo-jelitowych (patrz Figura 2C). Trwale transfekowaliśmy MUC1 do ludzkich komórek jelitowych HCT116, które normalnie wyrażają bardzo niskie poziomy MUC1 (Figura 2D). Konfluentne komórki HCT116 hodowano wspólnie z C. jejuni w warunkach mikroaerofilnych, aby zapewnić bardziej fizjologiczne środowisko dla bakterii (19). Ekspresja MUC1 sprzyjała szybszemu przyleganiu bakterii, ale nie miała wpływu na późniejszą adhezję ani stopień inwazji komórek nabłonka (Figura 2D). Figura 2C
[podobne: jak przygotować bakłażana, chusteczki antybakteryjne, narodowy fundusz zdrowia sanatorium ]
[przypisy: narodowy fundusz zdrowia sanatorium, dlaczego ziewanie jest zaraźliwe, bytovia bytów ]
[hasła pokrewne: narodowy fundusz zdrowia sanatorium, dlaczego ziewanie jest zaraźliwe, bytovia bytów ]