Kwasy żółciowe obniżają poziom trójglicerydów poprzez szlak obejmujący FXR, SHP i SREBP-1c ad 5

U myszy ekspresja MCAD i LCAD znacznie zmniejszyła się po 7 dniach leczenia CA. Co interesujące, u myszy KK-Ay nie zaobserwowano zmian w ekspresji tych genów. Tak więc zwiększona ekspresja genów zaangażowanych w P-utlenianie kwasów tłuszczowych nie jest odpowiedzialna za zmniejszenie TG w surowicy. Oprócz tych różnic w genach związanych z utlenianiem a, nie zaobserwowano większych różnic między wynikami uzyskanymi u myszy KK-Ay i C57BL / 6J. Tabela 1CA zmniejsza ekspresję SREBP-1c i innych genów lipogennych. Co interesujące, zmiany w ekspresji genów zaangażowanych w lipogenezę były równolegle ze zmianami w ekspresji SREBP-1c (Tabela 1). Ponadto ekspresja SHP wykazała odwrotny wzór, z silną indukcją po leczeniu CA. SHP jest docelowym genem FXR, który hamuje aktywność kilku receptorów jądrowych, w tym LRH-1 i LXR, które są niezbędne do transkrypcji 7. -Hydroksylazy cholesterolu (CYP7A1, patrz Tabela 1), enzymu ograniczającego szybkość w kwasie żółciowym biosynteza. Ta indukowana FXR indukcja SHP leży u podstaw regulacji ujemnego sprzężenia zwrotnego w biosyntezie kwasów żółciowych (17, 18, 23, 31. 33). Wpływ CA na lipogenezę wydaje się być specyficzny dla wątroby, ponieważ w białej tkance tłuszczowej żaden z genów lipogennych nie został obniżony w ekspresji w odpowiedzi na leczenie CA (dane nie przedstawione). Aktywność promotora SREBP-1c jest tłumiona przez kwasy żółciowe i SHP. Zbadaliśmy zdolność CDCA do obniżania ekspresji endogennego SREBP-1c i jego docelowych genów in vitro w pierwotnych hepatocytach myszy. Wcześniej wykazano, że promotor SREBP-1c jest regulowany przez LXR, efekt, który przyczynia się do zwiększenia aktywności TG agonistów LXR (10, 11). Potwierdziliśmy indukcję endogennej ekspresji SREBP-1c przez ligandy RXR i LXR i wykazaliśmy, że ta ekspresja zmniejszała się zależnie od dawki poprzez zwiększanie ilości CDCA. Ekspresja lipogennych genów docelowych SREBP-1c również uległa zmniejszeniu (Figura 3A). To zmniejszenie było najsilniejsze dla SCD-1, ale zmniejszono także ekspresję AceCS i ME. Ekspresja SHP została zwiększona przez dodanie CDCA. Wyniki te pokazują, że zarówno in vivo, jak i in vitro, ekspresja endogennego SREBP-1c, a także enzymów lipogennych, które są regulowane przez SREBP-1c, jest znacząco zmieniona przez kwasy żółciowe. Figura 3 Kwasy dymne i SHP zmniejszają ekspresję z promotora SREBP-1c. (A) Ekspresja SREBP-1c i kilku jego docelowych genów w pierwotnych hodowlach hepatocytów wątroby myszy. Obecność ligandów dla LXR (22 (R) -hydroksycholesterol, 20. M) i RXR (LG100268, 1. M) jest oznaczona znakiem +. FXR aktywowano przez dodanie CDCA do pożywki (50. M i 200. M). (B) Aktywność mysiego promotora SREBP-1c w linii komórkowej McA-RH7777 po dodaniu 200 .M CDCA lub 200 .M CA do pożywki. Komórki testowano pod nieobecność lub obecność kotransfekowanego LXR. i ligandy dla RXR i LXR w stężeniach określonych w A. (C) Schematyczne przedstawienie różnych konstruktów mysiego promotora SREBP-1c stosowanego w testach transfekcji. Miejsca wiązania dla LXR są wyświetlane jako owale. Numeracja nukleotydów odnosi się do kodonu startowego SREBP-1c. (D) Porównanie sekwencji LXRRE w ludzkich i mysich promotorach SREBP-1c. Numerami dostępu GenBank dla ludzkiej sekwencji promotora SREBP-1c są NT_010718 lub AC122129. (E) Aktywność reporterów mSREBP-1c w komórkach McA-RH7777 transfekowanych albo pustym wektorem ekspresyjnym albo wskazanymi kombinacjami wektorów ekspresyjnych dla mysiego LRH-1, mysiego RXRa, ludzkiego LXRa, mysiego SHP w obecności ( czarne słupki) lub nieobecność (białe słupki) LXR (22 (R) -hydroksycholesterol, 20 (M) i agonistów RXR (LG100268; (M). Aby zbadać tę potencjalną rolę kwasów żółciowych w regulacji ekspresji SREBP-1c, sklonowaliśmy mysi promotor SREBP-1c i wygenerowaliśmy konstrukt reportera lucyferazy (S1, Figura 3C). McA-RH7777 komórki raka wątroby szczura kotransfekowano tym konstruktem i LXR. wektor ekspresyjny i traktowany agonistami LXR i RXR w obecności lub nieobecności CA lub CDCA. Aktywność promotora SREBP-1c indukowano przez transfekcję LXR. i / lub dodanie jego ligandów. Ten wzrost był osłabiony, gdy komórki inkubowano z którymkolwiek z kwasów żółciowych (Figura 3B). Ponadto, indukcja aktywności promotora SREBP-1c przez agonistów LXR i RXR nie zależy od nadekspresji LXR, pokazując, że komórki McA-RH7777 mają endogenną aktywność LXR. Wpływ CA na ekspresję genów lipogennych, a także przeciwne zmiany w ekspresji genów SREBP-1c i SHP, skłoniły nas do analizy wkładu kaskady FXR-SHP do regulacji ekspresji genu SREBP-1c
[podobne: makijaz permanentny cena, rezonans magnetyczny puławy, zielone koktajle przepisy ]
[więcej w: rezonans magnetyczny puławy, szczepienie dur brzuszny, makijaz permanentny cena ]
[podobne: rezonans magnetyczny puławy, szczepienie dur brzuszny, makijaz permanentny cena ]