Identyfikacja ludzkiego współczynnika konduktów 1 z moczem jako nowego inhibitora wzrostu kryształów szczawianu wapnia

Wcześniejsze badania nad białkami, które hamują tworzenie się kamieni nerkowych, wykazały stosunkowo niewielką liczbę dobrze scharakteryzowanych inhibitorów. Identyfikacja dodatkowych inhibitorów kamiennych zwiększyłaby zrozumienie patogenezy i patofizjologii kamicy nerkowej. Połączyliśmy konwencjonalne metody biochemiczne z ostatnimi postępami w dziedzinie spektrometrii mas (MS) w celu zidentyfikowania nowego inhibitora wzrostu kryształów szczawianu wapnia (CaOx) w normalnym ludzkim moczu. Anionowe białka wyizolowano przez adsorpcję DEAE i rozdzielono przez filtrację żelu HiLoad 16/60 Superdex 75. Frakcję o silnej aktywności hamującej wzrost kryształów CaOx wyizolowano i oczyszczono metodą chromatografii anionowymiennej. Białko w 2 podfrakcjach, które zachowało aktywność hamującą, zidentyfikowano za pomocą desorpcji / jonizacji laserem wspomaganej matrycą. Czasu przelotu MS i jonizacji przez elektrorozpylanie. Poczwórnego tandemowego czasu lotu MS jako ludzkiego współczynnika koniczyny (TFF1). Analiza Western blot potwierdziła identyfikację białka spektrometrii masowej. Funkcjonalne badania TFF1 w moczu wykazały, że jego działanie hamujące było podobne do działania nephrocalcin. Hamująca aktywność TFF1 w moczu była zależna od dawki i była hamowana przez antysurowice TFF1. Przeciwciało anty C-końcowe było szczególnie skuteczne, zgodnie z naszym proponowanym modelem, w którym 4 C-końcowe resztki glutaminowe TFF1 oddziałują z jonami wapnia, aby zapobiec wzrostowi kryształów CaOx. Stężenia i względne ilości TFF1 w moczu pacjentów z idiopatycznym kamicą nerkową CaOx były istotnie mniejsze (2,5-krotnie dla stężeń i 5- do 22-krotnie dla względnych ilości) niż stężenia stwierdzone w grupie kontrolnej. Dane te wskazują, że TFF1 jest nowym silnym inhibitorem wzrostu kryształu CaOx z potencjalną rolą patofizjologiczną w kamicy nerkowej. Wprowadzenie Kamica nerkowa pozostaje problemem zdrowia publicznego na całym świecie, dotykając 1. 20% dorosłej populacji (1). Spośród wszystkich rodzajów kamieni nerkowych, szczawian wapnia (CaOx) jest najczęstszą kompozycją znalezioną w analizie chemicznej (2). Do dzisiaj patogeniczne mechanizmy powstawania kamieni pozostają niejasne. Jedną z długotrwałych hipotez jest to, że tworzenie się kamienia wiąże się z wewnątrzarodnikową krystalizacją kryształów, wzrostem i agregacją (3). Mocz od pacjentów z kamicą nerkową jest zwykle przesycony jonami wapnia i szczawianem (4), co sprzyja nukleacji i wzrostowi kryształów CaOx (5). Zarodkowane kryształy mogą być zatrzymane w nerkach tych pacjentów poprzez przyleganie do powierzchni nabłonka kanalików nerkowych (6, 7). W środowisku przesyconych jonów wapnia i szczawianu można wówczas formować kamień. W przeciwieństwie do tego kryształy jądrzaste nie są zatrzymywane w prawidłowej nerce (8). Obliczenie natężenia przepływu płynu nerkowego w nerkach i tempa wzrostu kryształów u zdrowych osób sugeruje, że kryształy jądra są eliminowane z prawidłowej nerki, zanim przyczepią się do powierzchni nabłonka kanalików (9, 10). Ponadto istnieją substancje urologiczne znane jako inhibitory kamienia . w normalnym płynie rurowym nerkowym, który hamuje wzrost kryształów wewnątrzpłytkowych, agregację i / lub adhezję do powierzchni nabłonka nerek (11). Substancje te obejmują białka, lipidy, glikozoaminoglikany i związki nieorganiczne. Uważa się, że nieprawidłowe poziomy funkcji i / lub ekspresji tych cząsteczek, zwłaszcza białek, w moczu i kanalikach nerkowych są związane z tworzeniem się kamienia (12-14). Inną hipotezą, po raz pierwszy opisaną przez Alexandra Randalla (15), jest to, że lokacja osadzania kryształów znajduje się w interstitium nerkowym w pobliżu lub na końcu brodawek nerkowych. Płytki Randalla, które zawierają kryształy apatytu, zwykle znajdują się w kamiennych formantach CaOx (16). Badanie biopsji uzyskanych podczas przezskórnej nephrolithotomy wykazało, że krystalizacja apatytowa początkowo występuje w błonach piwnicznych cienkiej pętli Henle, a następnie rozciąga się na vasa recta, rozprzestrzenia się na śródmiąższową tkankę otaczającą wewnętrzne rdzeniowe kanały gromadzenia i ostatecznie rozciąga się na brodawki nerkowe (17, 18). Erozja płytek Randall a w przestrzeni moczowej, która jest przesycona jonami wapnia i szczawianami, może wystąpić i może sprzyjać heterogennemu zarodkowaniu i tworzeniu kamieni nerkowych CaOx (17, 18). Chociaż twórcy kamienia CaOx wytwarzają śródmiąższowe kryształy apatytów, które tworzą dobrze znane płytki Randalla, nie rozwijają się w uszkodzeniach nabłonka, śródmiąższowym zapaleniu ani zwłóknieniu (17). Tworzenie kamienia CaOx jest również związane z bypasem jelitowym, który promuje hiperoksalurię. Badanie histopatologiczne nie ujawnia blaszki miażdżycowej na śródmiąższu, ale niektóre kryształy apatytów są zatkane w końcowych kanałach zbierających światło, które są związane z uszkodzeniem komórek nabłonka, śródmiąższowym zapaleniem i zwłóknieniem (17)
[przypisy: dlaczego ziewanie jest zaraźliwe, jak przygotować bakłażana, błonnik witalny opinie lekarzy ]
[podobne: bytovia bytów, rezonans magnetyczny otwarty warszawa, zielone koktajle przepisy ]
[więcej w: bytovia bytów, rezonans magnetyczny otwarty warszawa, zielone koktajle przepisy ]