Identyfikacja ludzkiego współczynnika konduktów 1 z moczem jako nowego inhibitora wzrostu kryształów szczawianu wapnia ad 5

Oba przeciwciała znacząco zmniejszyły aktywność hamującą wzrost TFO1 w moczu CaOx. Blokowanie hamującej aktywności TFF1 w moczu na jego C-końcu było bardziej skuteczne niż blokowanie na N-końcu (Figura 7D). Dane te wskazują, że koniec C TFF1 jest szczególnie ważny dla jego aktywności hamującej wobec wzrostu kryształów CaOx. Aktywność hamująca TFF1 w moczu na poziomach fizjologicznych. Prawidłowe stężenia TFF1 w moczu u 30 zdrowych, zdrowych osób mierzono testem ELISA (6,67 . 0,93 ng / ml). Nasze wyniki były podobne do danych ostatnio (7,04 . 6,43 ng / ml) u 100 zdrowych osób z użyciem testu radioimmunologicznego (34). Wydajność odzyskiwania białka z oczyszczania TFF1 w moczu przy użyciu naszego protokołu wynosiła w przybliżeniu 73,50%. 17,2%. Ponieważ charakterystykę aktywności hamującej wzrost kryształów CaOx w TFP1 w moczu, przedstawionej na Figurze 7, wykonano przy użyciu znacznie wyższych stężeń TFF1 niż normalnie, zbadano również hamującą aktywność TFF1 w moczu w stężeniach fizjologicznych. Figura 8 pokazuje kinetykę działania hamującego wzrost kryształów CaOx TFF1 w moczu w stężeniach 7, 70 i 700 ng / ml, jak również kontrolę (bez TFF1). Dane te wykazują znaczące hamowanie wzrostu kryształów przez fizjologiczne stężenie TFF1 (7 ng / ml) od 10 minut inkubacji do końca testu (1 godzina). Dodatkowo, wystąpiły istotne różnice pomiędzy 3 stężeniami badanego TFF1 w moczu. Figura 8Kinetyka aktywności hamującej wzrost kryształów CaOx TFF1 w moczu na poziomach fizjologicznych. Aktywność hamującą TFF1 w moczu w stężeniach 7, 70 i 700 ng / ml oceniano pod kątem tego, czy TFF1 w moczu na poziomach fizjologicznych może hamować wzrost kryształów CaOx. Test hamowania prowadzono przez dłuższy czas (do godziny) w celu symulacji długotrwałego efektu interakcji między kryształami i niskiego stężenia białka podczas normalnego stanu fizjologicznego. Dane przedstawiono jako odsetek wolnego wyczerpania szczawianu. Istotne zahamowanie wzrostu kryształów przez fizjologiczne stężenie TFF1 (7 ng / ml) obserwowano od 10 minut inkubacji do końca testu (1 godzina). Dodatkowo, wystąpiły istotne różnice pomiędzy 3 stężeniami badanego TFF1 w moczu. n = 3 na grupę. Różnicowe poziomy TFF1 w moczu u pacjentów z idiopatycznym kamicą nerkową CaOx w porównaniu z normalnymi zdrowymi kontrolami. Stężenie TFF1 w moczu u 23 pacjentów (12 mężczyzn i 11 kobiet) z idiopatycznymi kamieniami nerkowymi CaOx oraz u 30 zdrowych osób zdrowych (14 mężczyzn i 16 kobiet) mierzono za pomocą testu ELISA. Charakterystykę kliniczną pacjentów z idiopatyczną kamicą nerkową CaOx zestawiono w Tabeli 1. Osiemnastu pacjentów miało nowy początek (pierwszy epizod) choroby kamicy nerkowej, podczas gdy pozostałe 5 miało nawracającą (drugi epizod) chorobę kamienia nerkowego. Pięciu pacjentów miało kamień, 4 pacjentów miało 2 kamienie, a 14 pozostałych miało 5 lub więcej kamieni. Wielkość kamieni wahała się od 1,0 do 5,0 cm. W tym doświadczeniu analizowano równe ilości wszystkich anionowych białek izolowanych z 10 ml moczu każdego dawcy. Figura 9A wyraźnie pokazuje, że stężenia TFF1 w moczu u pacjentów z idiopatycznym kamicą nerkową CaOx były znacząco niższe niż w normalnych kontrolach (2,66 . 0,46 wobec 6,67. 0,93 ng / ml, P <0,0001, różnica około 2,5-krotna). Po normalizacji za pomocą kreatyniny w moczu (Cr, który reprezentowałby całkowitą ilość TFF1 wydalanego w ciągu dnia), względne ilości TFF1 w moczu kostek wapnia CaOx pozostały znacznie mniejsze (3,24 . 0,62 wobec 17,19 . 3,49 ng / mg Cr; P <0,0001, około 5-krotna różnica, Figura 9B). Ta różnica pozostała wysoce znacząca po normalizacji z całkowitym białkiem (11,08 . 3,21 vs. 247,27. 53,68 ng / mg białka całkowitego, P <0,0001, przybliżona 22-krotna różnica, Figura 9C). Figura 9 Różne poziomy moczu w TFF1 w kostkach wapniowych CaOx w porównaniu z normalnymi zdrowymi kontrolami. (A) Stężenie TFF1 w moczu mierzono za pomocą testu ELISA, stosując równe ilości (40 .g) wszystkich anionowych białek izolowanych z 10 ml moczu każdego dawcy. Stężenia TFF1 w moczu u pacjentów z idiopatycznym kamicą nerkową CaOx (2,66 ~ 0,46 ng / ml; n = 23, 12 mężczyzn i 11 kobiet) były znacząco niższe niż u zdrowych osób (6,67 . 0,93 ng / ml; n = 30, 14 mężczyzn i 16 kobiet). (B) Po normalizacji z Cr z moczem, względne ilości TFF1 w moczu pacjentów z kamieniem CaOx pozostały znacznie mniejsze (3,24 . 0,62 wobec 17,19 . 3,49 ng / mg Cr) [hasła pokrewne: narodowy fundusz zdrowia sanatorium, porozumienie rodzicielskie wzór, rezonans magnetyczny puławy ] [hasła pokrewne: szczepienie dur brzuszny, makijaz permanentny cena, leczenie zębów w narkozie ] [patrz też: szczepienie dur brzuszny, makijaz permanentny cena, leczenie zębów w narkozie ]