Hepatic Niemann-Pick C1 Jak 1 reguluje stężenie cholesterolu w żółci i jest celem ezetymibu czesc 4

Zatem obserwowane zmniejszenie poziomu cholesterolu w żółci myszy L1-Tg nie było sprzężone ze zmniejszoną ekspresją wątrobową ABCG5 i ABCG8. Ponieważ ABCB4 i ABCB11 również zmieniają wydzielanie cholesterolu w żółci (27, 28), mierzono poziomy mRNA ABCB4 i ABCB11 i nie stwierdzono żadnych znaczących zmian (Figura 3B). Zawartość cholesterolu w wątrobie u myszy L1-Tg jest minimalnie zmieniona. Aby zbadać metaboliczne następstwo zmniejszenia wydzielania cholesterolu z udziałem NPC1L1, analizowano lipidy wątrobowe i plazmatyczne. Nie wykryto różnic między myszami WT, L1-Tg20 i L1-Tg112 o zawartości 0,015% cholesterolu, o zawartości wątroby w FC, triglicerydzie (TG) i PL, podczas gdy zawartość estru cholesterolu (CE) u myszy L1-Tg20 wynosiła nieznacznie, ale znacznie wyżej niż u myszy WT (tabela 1). Po karmieniu dietą o stężeniu 0,2% cholesterolu, myszy L1-Tg20 i L1-Tg112 miały nieznacznie, ale znacznie wyższe ilości wątrobowego FC i PL w porównaniu z myszami WT (Tabela 1). Nie stwierdzono różnic w zawartości wątroby CE i TG wśród myszy L1-Tg20, L1-Tg112 i WT karmionych dietą o zawartości 0,2% cholesterolu. Tak więc hamowanie wydzielania cholesterolu z żółcią za pośrednictwem NPC1L1 powodowało jedynie niewielkie gromadzenie się cholesterolu w wątrobie. Ponadto nie zaobserwowano różnic między myszami WT i L1-Tg w masach ciała, wadze wątroby, stosunkach wagi wątroby i ciała oraz poziomach aminotransferazy asparaginianowej, aminotransferazy alaninowej i bilirubiny (Tabela 1), co wskazuje, że L1-Tg myszy rosną normalnie i mają prawidłową czynność wątroby. Tabela Parametry w wątrobie i osoczu myszy WT i L1-Tg Minimalne zmiany w stężeniu cholesterolu wątrobowego myszy L1-Tg były zgodne z niewielkimi zmianami poziomów mRNA docelowych genów LXR i genów w szlaku biosyntezy cholesterolu, w tym SREBP. -1c, białko transferowe PL, ABCG5 / ABCG8 (Figura 3B), SREBP-2, reduktaza koenzymu HMG i syntaza koenzymu HMG (dane nie pokazane). Poziom cholesterolu w osoczu jest zwiększony u myszy L1-Tg. W celu sondowania handlu cholesterolem pochodzącym od NPC1L1 zmierzono lipidy w osoczu. Co ciekawe, zaobserwowano znaczny wzrost stężenia cholesterolu w osoczu u myszy L1-Tg (Tabela 1). Po karmieniu dietą 0,015% cholesterolu myszy L1-Tg20 i L1-Tg112 wykazały 43% wzrost całkowitego cholesterolu w osoczu (TC) i odpowiednio 41% i 21% w FC w porównaniu z myszami WT. Karmienie diety 0,2% w porównaniu z 0,015% cholesterolu powodowało wzrost TC i FC osocza dla wszystkich 3 genotypów. Jednakże myszy L1-Tg20 i L1-Tg112 nadal wykazywały znacznie wyższe stężenia TC i FC w osoczu niż u myszy WT. Stężenia TG w osoczu były podobne dla myszy wszystkich 3 genotypów w obu dietach. Zwiększone stężenie cholesterolu w osoczu w dużej mierze gromadzi się w HDL bogatym w apoE u myszy L1-Tg. W celu dalszego scharakteryzowania zmian w stężeniu cholesterolu w osoczu określono rozkłady poziomów lipoprotein w osoczu i apolipoprotein dla myszy L1-Tg112 i WT (Figura 4, A i B). Na obu dietach 0,015 i 0,2% cholesterolu, L1-Tg112 w porównaniu z myszami WT wykazywały wzrost poziomu cholesterolu HDL. Jednakże, skład apolipoprotein L1-Tg112 i WT HDL był bardzo podobny (Figura 4B, frakcje 29. 32), przy czym głównym składnikiem jest apoA-I, a mniejszymi składnikami są apoA-II, apoA-IV i apoCs. Oprócz wzrostu poziomu cholesterolu HDL myszy L1-Tg112 wykazywały gwałtowny wzrost poziomu cholesterolu przenoszonego na lipoproteiny o wielkości wskazującej na mały LDL lub duży HDL. Chociaż obecne były niewielkie ilości apoB100, apoA-I, apoA-II i apoC, główną apolipoproteiną na tym gatunku lipoprotein u myszy L1-Tg112 i WT był apoE (figura 4B, frakcje 24-26). Ponieważ ilość apoE na żelu do dystrybucji apolipoproteiny nie jest ilościowa, poziomy apoE w osoczu określono metodą immunoblottingu i densytometrii. W porównaniu z myszami WT poziom białka apoE w osoczu był istotnie wyższy u myszy L1-Tg (Figura 4C). Figura 4 Zwiększony poziom cholesterolu w osoczu jest głównie przenoszony na HDL bogatym w apoE. (A) Rozkład cholesterolu lipoprotein osocza u samców myszy WT i L1-Tg112 określono w sposób opisany w Methods. (B) Rozkład apolipoproteiny lipoprotein osocza u samców myszy WT i L1-Tg112 określono w sposób opisany w Methods. Dane stanowią jakościową, a nie ilościową analizę apolipoprotein. (C) Kwantyfikacja poziomów apoE w osoczu metodą immunoblottingu. Osocze pobierano od myszy 4 WT i 4 myszy L1-Tg112 karmionych dietą 0,2% cholesterolu przez 21 dni. Po rozcieńczeniu 1: 200 w roztworze soli, 14 .l rozcieńczonych próbek poddawano immunoblottingowi z króliczą surowicą anty-szczurzym apoE i oznaczano ilościowo jak opisano w Metodach
[przypisy: jak przygotować bakłażana, bytovia hpu pl, poradnia rodzinna zdrowie ]
[hasła pokrewne: chusteczki antybakteryjne, błonnik witalny opinie lekarzy, narodowy fundusz zdrowia sanatorium ]
[więcej w: chusteczki antybakteryjne, błonnik witalny opinie lekarzy, narodowy fundusz zdrowia sanatorium ]