Hepatic Niemann-Pick C1 Jak 1 reguluje stężenie cholesterolu w żółci i jest celem ezetymibu ad 6

Żółć zebrano za pomocą wspólnej kaniulacji kanałów żółciowych od samców myszy WT i L1-Tg20 potraktowanych ezetymibem (Ezet). Stężenia lipidów w drogach żółciowych analizowano i obliczano stosunki molowe lipidów. Pojazd, pojazd. (B) Wydalanie obojętnego steroli w kale mierzono na myszach WT i L1-Tg20 traktowanych ezetymibem, jak opisano w Metodach. (C) Po karmieniu dietą 0,015% cholesterolu przez 18 dni, samce myszy WT i L1-Tg112 podawano codziennie w dniach 18. 24 przez 10 mg / kg ezetymibu lub zaróbkę. Myszy utrzymywano na tej samej diecie podczas leczenia. Po 4-godzinnym poście w dniu 25 myszy uśmiercono i oznaczono stężenie TC w osoczu. Wartości są średnie. SEM próbek 4. 5 (A i B) lub 5. 7 (C). P <0,05 wśród *,, i. grupy dla każdego pomiaru (ANOVA). Ezetymib przywraca stężenie cholesterolu w osoczu myszy L1-Tg. Aby zbadać wpływ ezetymibu na metabolizm cholesterolu w osoczu, oznaczano TC w osoczu myszy traktowanych zaróbką lub ezetymibem (10 mg / kg / d) przez 7 dni (Figura 6C). Po traktowaniu nośnikiem myszy L1-Tg112 utrzymywały znaczący 38% wzrost TC w osoczu w porównaniu z myszami WT. Jednakże podawanie ezetymibu myszom L1-Tg112 powodowało znaczące zmniejszenie stężenia TC o 26% w porównaniu z myszami L1-Tg112 traktowanymi podłożem. Ponadto, stężenie TC myszy L1-Tg112 traktowanych ezetymibem nie różniło się istotnie od myszy traktowanych nośnikiem lub traktowanych ezetymibem WT. Omówienie W 2 niezależnych transgenicznych liniach myszy odkryliśmy, że ekspresja NPC1L1 w wątrobie w kanale prowadzi do drastycznego zmniejszenia stężenia cholesterolu w żółci, ale nie do stężeń PL i BA; ten spadek był związany ze wzrostem stężenia cholesterolu w osoczu. Zwiększony poziom cholesterolu w osoczu był głównie związany z cząstkami HDL bogatymi w apoE. Inhibitor wchłaniania cholesterolu, ezetimib, praktycznie przywrócił normalny fenotyp myszy L1-Tg. Odkrycia te określają wątrobowy szlak NPC1L1 jako potencjalny mechanizm regulujący homeostazę cholesterolu całego ciała i wątrobę jako kolejny cel działania ezetymibu. Odkrycie kanalicznej lokalizacji NPC1L1 w L1-Tg i ludzkiej wątrobie jest zgodne z naszymi wcześniejszymi badaniami wykazującymi, że NPC1L1 lokalizuje się na kanalikowej błonie hepatocytów u małp i na kanalikopodobnej strukturze sprzężonych przysadek komórek wątrobiaka (10). Odpowiada to również stężeniu szczurzego NPC1L1 do apikalnej błony enterocytów (1, 3). Dlatego uważamy, że kanałowa błona hepatocytów reprezentuje naturalną lokalizację NPC1L1 w wątrobie. Jednym rozsądnym wytłumaczeniem zmniejszenia poziomu cholesterolu w żółci u myszy L1-Tg jest to, że kanałowy NPC1L1 transportuje cholesterol z kanalików żółciowych z powrotem do hepatocytów. Kilka dowodów potwierdza to wyjaśnienie: (a) NPC1L1 jest wymagany, aby enterocyty absorbowały FC ze światła jelita (1), co wskazuje, że białko znajduje się w szlaku wychwytu cholesterolu; (b) nasze ostatnie badania pokazują, że ekspresja NPC1L1 w komórkach wątrobiaka ułatwia wychwyt pozakomórkowego FC bez hamowania wypływu cholesterolu (10); (c) NPC1L1 fizycznie lokalizuje się w kanalikowej błonie hepatocytów (10) (Figura 2); i (d) ostatnie doniesienia sugerują, że mechanizmy inne niż ABCG5 / ABCG8 uczestniczą w regulacji wydzielania cholesterolu w żółci u myszy (13, 14) i ludzi (15). Jednakże bezpośredni pomiar wychwytu cholesterolu od strony kanału u hepatocytów u zwierzęcia jest technicznie trudny. Aby zmierzyć wychwyt cholesterolu z przewodu żółciowego, oznaczony cholesterol wraz z niewchłanialnym markerem musi być precyzyjnie dostarczony do mikroskopijnego przewodu żółciowego, a następnie oznaczony znakowany cholesterol i marker w izolowanych hepatocytach i osoczu. Wprowadzenie znakowanego cholesterolu i wstecznego markera z przewodu żółciowego do przewodu żółciowego wymaga zastosowania pewnego ciśnienia na światło przewodu żółciowego, aby przeciwstawić się sile stałego przepływu żółci, co może uszkodzić ścisłe połączenie między hepatocytami i spowodować wyciek wyznakował cholesterol i marker w wątrobie i osoczu. Dodatkowo, sitosterol i sitostanol, 2 niewchłanialne markery sterolowe, które były używane do pomiaru absorpcji cholesterolu w jelitach, nie mogły być stosowane w tej sytuacji, ponieważ prawdopodobnie dzielą się z cholesterolem wspólną trasą NPC1L1 do wejścia do komórki (4). W wyniku trudności technicznych nie było dostępnych bezpośrednich dowodów na poparcie mechanizmu transportującego cholesterol z przewodu żółciowego do hepatocytów [podobne: szpital powiatowy mikołów, ubezpieczenia zdrowotne prywatne, poradnia rodzinna zdrowie ] [hasła pokrewne: zielone koktajle przepisy, jak przygotować bakłażana, największa wagina na świecie ] [patrz też: zielone koktajle przepisy, jak przygotować bakłażana, największa wagina na świecie ]