Hepatic Niemann-Pick C1 Jak 1 reguluje stężenie cholesterolu w żółci i jest celem ezetymibu ad 5

Wartości są średnie. SEM z 4 próbek. (D) Skład FA lipoproteiny CE określono jak opisano w Metodach dla samców myszy WT i L1-Tg112. Wartości są sumą procentów nasyconych (16: 0 i 18: 0) i jednonienasyconych (16: i 18: 1) FA podzielonych przez procent wielonienasyconych (18: 2, 20: 4, 20: 5, i 22: 6) FA. * P <0,05 względem WT (test ucznia). Aby scharakteryzować bogatą w apoE lipoproteinę (ERL), wyizolowaliśmy LDL, ERL i HDL z myszy WT i L1-Tg112 za pomocą chromatografii wykluczania rozmiarów i określiliśmy procentowe składy chemiczne tych cząstek, jak opisano poprzednio (29). Podobnie do kompozycji apolipoproteinowych (Figura 4B), procentowe składy chemiczne były prawie identyczne w obrębie każdej klasy lipoprotein izolowanych z myszy WT i L1-Tg112 (Tabela 2). Jednak procentowe składy chemiczne LDL, ERL i HDL były diametralnie różne. ERL miał procent FC i białka, które były podobne do LDL. Natomiast wartości procentowe TG i PL w ERL były podobne do HDL. Tak więc wydaje się, że ERL ma skład chemiczny podobny do LDL i HDL. Jednakże, w porównaniu z LDL i HDL, ERL był wyjątkowy, ponieważ zawierał pośrednią ilość CE i miał najniższy stosunek CE / FC, wskazując na wzbogacenie FC w tę cząsteczkę lipoproteiny. Tabela 2 Skład chemiczny lipoprotein w osoczu Wykazano, że u myszy, nasycone i jednonienasycone kwasy tłuszczowe (FA), które są głównie stosowane w acyl-CoA: acylotransferaza cholesterolowa 2 (ACAT2) w wątrobie, są głównymi FA w LDL-CE , podczas gdy wielonienasycone FA, które są preferencyjnie stosowane w acylotransferazie lecytyna: cholesterol (LCAT) w osoczu, stanowią większość FA w HDL-CE (30, 31). W celu dalszego zdefiniowania ERL określono skład FA CE w ERL. Stosunki nasyconych plus jednonienasyconych FA do wielonienasyconych FA dla LDL-CE, ERL-CE i HDL-CE wynosiły odpowiednio około 3, 0,8 i 0,6 (Figura 4D). Wyniki te wskazują, że skład FA ERL-CE jest podobny do tego występującego w HDL-CE, który pochodzi głównie z LCAT. W związku z tym wyznaczyliśmy te cząstki lipoproteinowe HDL bogate w ApoE. Ponieważ duże cząstki HDL o wysokiej zawartości apoE obserwuje się także u myszy bez receptora wymiatacza klasy B typu I (SR-BI) (32, 33) i u transgenicznych myszy z nadekspresją ABCA1 w wątrobie (34), wątrobowa ekspresja SR-BI i ABCA1 zostały określone. Bez względu na karmienie genotypem i cholesterolem, poziomy mRNA wątrobowego SR-BI i ABCA1 były w dużej mierze niezmienione (dane nie pokazane). Poziom białka SR-BI również pozostał niezmieniony (Figura 5). Co ciekawe, poziomy białka ABCA1 były konsekwentnie wyższe u myszy L1-Tg w porównaniu z myszami WT karmionymi dowolną dietą (Figura 5). W porównaniu z myszami karmionymi dietą 0,015% cholesterolu, myszy WT i L1-Tg karmione dietą o stężeniu 0,2% cholesterolu miały wyższe poziomy białka ABCA1. W celu dalszego zbadania mechanizmu leżącego u podstaw akumulacji cholesterolu w osoczu myszy L1-Tg, poziomy mRNA wątrobowego innych genów ważnych w metabolizmie lipoprotein. w tym receptor LDL (LDLR), apoB, apoE i konwertaza proproteinowa subtylizyna / keksyna typu 9a (PCSK9). zostały również określone ilościowo i nie znaleziono żadnych zmian (dane niepokazane). Określono także poziom białka w LDLR i nie zaobserwowano żadnych zmian (Figura 5). Figura 5 Wrzodziejące białko ABCA1 jest zwiększone u myszy L1-Tg. Filtr immunoblotowy użyty na Figurze 2C został odpędzony i ponownie rozbity z przeciwciałami na ABCA1 (51), SR-BI (46) i LDLR (46). Immunoblot ludzkiego NPC1L1 i RAP pokazanego na Figurze 3C są odtworzone tutaj jako kontrola. Eksperyment powtórzono dwukrotnie z podobnymi wynikami. Ezetymib przywraca żółciowy wydalanie cholesterolu u myszy L1-Tg. Aby przetestować naszą hipotezę, że ezetymib hamuje czynność wątroby NPC1L1, wpływ ezetymibu na wydalanie cholesterolu z żółcią określono na myszach WT i L1-Tg20 traktowanych zaróbką lub 10 mg ezetymibu / kg / dzień przez 4 dni. Żółć zebrano przez kaniulację wspólnego przewodu żółciowego i zmierzono jej skład lipidowy (Figura 6A). W oparciu o stosunek molowy, stwierdzono 10-krotnie mniej cholesterolu w żółci myszy L1-Tg20 traktowanych podłożem w porównaniu do myszy WT. Jednak stosunek molarny cholesterolu z żółcią u myszy L1-Tg20 traktowanych ezetymibem był podobny jak u myszy WT traktowanych ezetymibem. Wyniki były podobne dla stężeń cholesterolu w żółci. W odróżnieniu od cholesterolu, stężenia żółciowych PL i BA oraz stosunki molowe nie różniły się u myszy WT i L1-Tg20 leczonych zaróbką lub ezetymibem. Ponadto ustalono, że ezetymib zwiększał wydalanie obojętnego sterolu (cholesterolu i jego metabolitów bakteryjnych) zarówno u myszy WT, jak i L1-Tg20 (Figura 6B), co pokazuje, że wpływ ezetymibu na wchłanianie cholesterolu w jelitach utrzymywał się u myszy L1-Tg. . Figura 6Ezetymib odtwarza stężenia cholesterolu w żółci i osoczu u myszy L1-Tg
[przypisy: makijaz permanentny cena, bytovia hpu, porozumienie rodzicielskie wzór ]
[hasła pokrewne: dlaczego ziewanie jest zaraźliwe, bytovia bytów, rezonans magnetyczny otwarty warszawa ]
[hasła pokrewne: dlaczego ziewanie jest zaraźliwe, bytovia bytów, rezonans magnetyczny otwarty warszawa ]