Brodawka nerek jest niszą dla komórek macierzystych nerki dorosłych czesc 4

Jednak mniej niż 0,5% wszystkich komórek było dodatnich pod względem CD34, CD44 lub c-Kit, co wskazuje, że jeśli hematopoetyczne komórki macierzyste lub mezenchymalne komórki macierzyste szpiku kostnego zostały wyizolowane z komórkami brodawkowatymi nerki, ich wkład w populację BrdU -przeznaczone komórki (około 40% wszystkich komórek) były małe. Ponieważ nerka ma bardzo wysokie ukrwienie, prawdopodobnie te komórki stanowią zanieczyszczenie. z krwinkami wewnątrznerkowymi. Krótko po przyłączeniu do naczynia hodowlanego większość komórek ma właściwości nabłonkowe, przy czym ZO-1 jest wyraźnie eksprymowany w ich ścisłych złączach (Figura 4D); jednakże, jak wcześniej stwierdziliśmy w metanometrycznych mezenchymalnych komórkach macierzystych (13), wiele komórek brodawkowatych koeksprymowało zarówno nabłonkowe, jak i mezenchymalne białka, takie jak aktyna mięśniowa (.-mięśniowa (Figura 4E). W warunkach hodowli kontrolnej, w ciągu 2 tygodni od zaszczepienia, wszystkie komórki stały się wrzecionowatymi kształtami i wykazywały ekspresję .-aktyny mięśni gładkich (Figura 4F). Jednakże, gdy komórki były hodowane w 1,5% O2, ogromna większość komórek zachowywała fenotyp nabłonka (Figura 4G). Zwracamy uwagę, że brodawka nerkowa ma niskie napięcie tlenowe. Kule komórkowe. Embrionalne komórki macierzyste i dojrzałe narządowo komórki macierzyste hodowane w hodowli łatwo tworzą agregaty i / lub kulki (14. 17), zwane neurosferami w przypadku neuronalnych komórek macierzystych, i często można określić, że te kule pochodzą z pojedynczej komórki (17). Chociaż komórki brodawczaków nerkowych hodowano w warunkach hodowli kontrolnej przyłączonych do naczynia hodowlanego, często tworzyły sferyczne agregaty komórek przypominające neurosfery (Figura 4H). Ta tendencja była znacznie zwiększona, gdy komórki hodowano w pożywce hodowlanej bez surowicy (Figura 4I). W tych warunkach wiele komórek w agregatach stało się pozytywnych (rysunek 4J). Agregaty komórek były luźno związane z powierzchnią hodowli i / lub unosiły się w pożywce, charakterystycznej dla neurosfer i sfer pochodzących z zarodkowych komórek macierzystych. Przeniesienie agregatu komórkowego do nowego naczynia ze standardowymi pożywkami spowodowało proliferację komórek. Wysiewanie komórek na fibronektynie znacznie hamowało tworzenie sfer komórkowych przez komórki brodawkowe. Charakterystyka klonów komórek brodawczakowatych nerki. Trzy niezależne klony komórek brodawkowatych nerki ustalono stosując standardowe metody klonowania pojedynczych komórek i wszystkie dały identyczne wyniki. Jak pokazano na Figurze 5, A i B (lewe panele), w standardowych warunkach hodowli, komórki były miofibroblastopodobnymi i w kształcie wrzeciona i eksprymowanymi białkami mezenchymalnymi, takimi jak (3-aktyna mięśniowa mięśni. Jednak komórki również koeksprymowały białka nabłonkowe, takie jak ZO-1 (Figura 5A, po prawej). Ponadto, gdy warunki hodowli zostały zmienione, potomstwo komórki uległo ekspansji (Figura 5B); w warunkach hodowli kontrolnej bez płodowej surowicy bydlęcej, wszystkie komórki wyrażały P-mięśniową masę mięśniową i miały kształt wrzeciona (Figura 5B po lewej stronie), ale w obecności czynnika hamującego białaczkę (LIF) większość komórek stała się ujemna dla. mięśni gładkich aktyny i tworzyły monowarstwę, podczas gdy niewielka liczba komórek zachowywała fenotyp miofibroblastu, wyrażając .-mięśniową aktynę mięśniową i rosła na wierzchu monowarstwy (Figura 5B, po prawej). Figura 5 Charakteryzacja klonów komórek brodawczakowatych nerki. (A) Jak pokazuje przykład, wiele komórek koeksprymowało białka mezenchymalne, takie jak (3-aktyna mięśniowa mięśni (po lewej), jak również białka nabłonkowe, takie jak ZO-1 (po prawej). (B) W standardowych warunkach kontrolnych w nieobecności surowic, wszystkie komórki miały kształt wrzeciona i były silnie zabarwione dla aktyny. Mięśni gładkich (kontrola, lewa strona), ale gdy dodano LIF do pożywki, widoczne były dwa fenotypy (+ LIF; po prawej): większość komórek rosła w pojedynczej warstwie i była ujemna pod względem. -smotnej aktyny mięśni (jądra barwione 10 nM Sytox green), ale kilka komórek rosło na wierzchu pojedynczej warstwy komórek, miało wrzeciono i wyrażało . -Miękki mięśniowej aktyny. (C) W standardowych warunkach hodowli kontrolnej niewielka liczba komórek wydzielała włókno pośrednie nestin. Okazjonalne komórki również wyrażały markery neuronalne klasy III (3 -tubuliny (III-y-tubuliny), a niektóre komórki nawet nabyły cechy morfologiczne neuronów. Skalowane pręty: A, 20 .m; B i C, 50 urn. Inne badanie dalej sugerowało, że komórki te mogą powodować więcej niż jeden typ komórek, gdy komórki były badane za pomocą markerów neuronowych. Jak pokazano na Figurze 5C, poszczególne klony dały początek heterogennym populacjom komórek, z niektórymi komórkami eksprymującymi nestynę, markerem neuronalnych komórek macierzystych (18), a niektóre komórki okazały się dodatnie dla. -Tubuliny klasy III, markera w pełni zróżnicowane neurony (19)
[podobne: barszcz czerwony magdy gessler, błonnik witalny opinie lekarzy, jak przygotować bakłażana ]
[więcej w: rezonans magnetyczny puławy, szczepienie dur brzuszny, makijaz permanentny cena ]
[przypisy: rezonans magnetyczny puławy, szczepienie dur brzuszny, makijaz permanentny cena ]