Brodawka nerek jest niszą dla komórek macierzystych nerki dorosłych ad 6

Aby to sprawdzić, najpierw zbadaliśmy, czy proliferacja komórkowa może być wykryta w brodawce nerkowej po niedokrwieniu. Zastosowano dwie niezależne metody. W pierwszym, przejściowym jednostronnym niedokrwieniu nerek indukowano szczury i 36 godzin później obie nerki zebrano, a ich brodawki zbadano pod kątem obecności markera komórek proliferujących, antygenu Ki-67 (22). Reprezentatywny przykład czterech eksperymentów pokazano na rysunku 8A. Podczas gdy brodawki z kontrolnej nerki zasadniczo nie miały sygnału, antygen Ki-67 był łatwo wykrywalny w brodawki niedokrwionej nerki, co wskazuje, że wiele komórek brodawkowatych weszło do cyklu komórkowego. Figura 8 Rozrost komórek w brodawki nerkowej po przejściowym niedokrwieniu nerkowym. (A_C) W celu wykrycia, czy proliferacja komórkowa występuje w brodawki nerkowej po przejściowym niedokrwieniu nerki, 36 godzin po epizodzie, zebrano nerki i zbadano brodawki. (A) Kontrolne i niedokrwione brodawki tego samego zwierzęcia barwione przeciwciałem przeciwko markerowi komórek proliferacyjnych Ki-67 (rodaminą). Tylko brodawki po niedokrwiennej nerce wykazały znaczną proliferację. (B i C) Kontrolne i niedokrwione brodawki dwu różnych eksperymentów, w których szczurom podano dawkę BrdU godzinę przed eutanazją i skrawki brodawki badano pod kątem inkorporacji BrdU jako markera syntezy DNA. Odcinki brodawek nerkowych mają 100 .m grubości. (B) Sekcje brodawkowe z obszaru zewnętrznego lub przyściennego (u góry), środkowego (środkowego) i wierzchołka (u dołu) z nerek kontrolnych i niedokrwiennych. Jak pokazano, syntezę DNA wykryto tylko w brodawki po niedokrwiennej nerce, szczególnie w zewnętrznej brodawki, obszarze obok rdzenia. (C) W nerce poddanej przemijającemu niedokrwieniu, synteza DNA w komórkach brodawkowatych była najbardziej widoczna w obszarze sąsiadującym z przestrzenią moczową zewnętrznej brodawki. Skalowane pręty: 50 .m. W drugim sposobie proliferację komórkową badano przez syntezę DNA. U szczurów wywołaliśmy przemijające jednostronne niedokrwienie nerek i 36 godzin później podano jedną dawkę BrdU zwierzętom na godzinę przed eutanazją; zatem w tym protokole. ostrym. Znakowanie BrdU, jaskrawo wybarwione komórki były komórkami, które syntetyzowały DNA w ciągu tej godziny. Figura 8, B i C, pokazuje wyniki z obu nerek z dwóch takich eksperymentów. Analiza 100-.m wycinków wykazała, że komórki proliferujące w korze i rdzeniu nerki kontrolnej i niedokrwiennych nerek miały więcej komórek proliferujących, szczególnie w rdzeniu (nie pokazano). Jednakże w brodawki nerek po niedokrwieniu były obfite komórki dzielące się (znakowane podczas godziny podawania BrdU), podczas gdy kontrolna brodawka nerkowa miała tylko kilka takich komórek (Figura 8B). Proliferacja nie została przypadkowo rozłożona w brodawki; był najbardziej widoczny w zewnętrznej brodawki, szczególnie w okolicy obok przestrzeni moczowej (tj. na obwodzie brodawki zewnętrznej, Figura 8C). Jednym z możliwych wyjaśnień tego miejsca jest to, że dzielące się komórki macierzyste (zwane komórkami wzmacniającymi tranzyt w innych narządach, odnośnik 10) migrują w kierunku rdzenia. Topologia brodawki sugeruje, że gdyby działał jako źródło migracji komórek do rdzenia, jego obwód może być idealnym centralnym miejscem dla wydajnej dystrybucji, ponieważ rdzeń ma znacznie większą objętość i odległość od zewnętrznej brodawki do dowolnego punktu w rdzeniu jest najkrótszy możliwy. Komórki brodawkowe podtrzymujące BrDU proliferują podczas naprawy nerek. Aby bezpośrednio zbadać, czy proliferacja komórek brodawkowatych, która występuje po przejściowym niedokrwieniu, obejmuje komórki zatrzymujące BrdU, użyliśmy szczurów, które zostały obciążone. z BrdU w okresie poporodowym i zebrane nerki 36 godzin po przemijającym niedokrwieniu. Części brodawki nerkowej badano pod kątem zarówno antygenu Ki-67, jak i BrdU. Figura 9 przedstawia przykład czterech takich eksperymentów. Figura 9A pokazuje jedną sekcję z wybarwianiem BrdU, barwieniem Ki-67 i połączonym obrazem, wskazując, że wiele komórek utrzymujących BrdU również eksprymuje marker Ki-67 proliferacji. Widać to wyraźniej w dwóch mikrofotografiach o wyższej mocy z fig. 9B. Zauważ, że niektóre komórki brodawkowate były pozytywne tylko dla BrdU, inne zawierały oba sygnały (tj. Były komórkami utrzymującymi BrdU, które ulegały proliferacji), podczas gdy jeszcze inne wyświetlały tylko sygnał Ki-67. Te ostatnie komórki mogą być komórkami, które nigdy nie zachowały BrdU lub mogły być potomstwem komórek utrzymujących BrdU, które utraciły sygnał, gdy nukleotyd został rozcieńczony podczas podziału komórki. Figura 9 Komórkowa proliferacja brodawkowych komórek BrdU-zatrzymujących po przejściowym niedokrwieniu nerkowym
[podobne: rezonans magnetyczny otwarty warszawa, największa wagina na świecie, szczepienie dur brzuszny ]
[więcej w: poradnia rodzinna zdrowie, chusteczki antybakteryjne, błonnik witalny opinie lekarzy ]
[hasła pokrewne: poradnia rodzinna zdrowie, chusteczki antybakteryjne, błonnik witalny opinie lekarzy ]