Kwasy żółciowe obniżają poziom trójglicerydów poprzez szlak obejmujący FXR, SHP i SREBP-1c ad 7

Tłumienie obniżenia poziomu CYP7A1 u myszy po podaniu agonisty FXR wyraźnie kontrastują z wcześniejszymi badaniami. Jest to prawdopodobnie odzwierciedlenie różnic w podejściu eksperymentalnym (1 dzień w porównaniu z 7 dni i 0,5% CA w porównaniu z 1% terapii CA), które faworyzowały aktywację wtórnych ścieżek regulacyjnych we wcześniejszych badaniach (23). Dane te dodatkowo potwierdzają, że SHP odgrywa zasadniczą rolę w pośredniczonej regulacji ekspresji SREBP-1c u myszy traktowanych kwasami żółciowymi. Figura 5SHP jest niezbędna do obniżenia poziomu lipogenezy za pośrednictwem kwasów żółciowych. (A) Myszy SHP _ / _ i SHP + / + karmiono dietą zawierającą 0,5% CA lub otrzymywano GW4064 przez zgłębnik doustny, a poziomy TG w surowicy mierzono po 0, 3 i 7 dniach (wiek 9 tygodni, n = 5). Continue reading „Kwasy żółciowe obniżają poziom trójglicerydów poprzez szlak obejmujący FXR, SHP i SREBP-1c ad 7”

Kwasy żółciowe obniżają poziom trójglicerydów poprzez szlak obejmujący FXR, SHP i SREBP-1c ad 6

Z tego powodu wygenerowaliśmy szereg konstruktów reporterów zawierających mutacje punktowe w dwóch wcześniej opisanych elementach odpowiedzi LXR (LXRRE, S6). Jak oczekiwano, aktywność promotora SREBP-1c jest indukowana przez nadekspresję RXR / LXR. heterodimer w komórkach wątrobiaka wątrobowego szczura McA-RH7777 w obecności naturalnego agonisty LXR i syntetycznego liganda RXR (10,11, 34). Gdy miejsca LXRRE są zmutowane lub usunięte, podstawowa aktywność promotora jest znacznie zmniejszona (S5 i S6, Figura 3E). Jest prawdopodobne, że efekt ten jest zachowany pomiędzy myszami i ludźmi, ponieważ ekspresja SREBP-1c jest również indukowana przez agonistę LXR w ludzkich komórkach wątrobiaka i pierwotnych hepatocytach (34, 35). Continue reading „Kwasy żółciowe obniżają poziom trójglicerydów poprzez szlak obejmujący FXR, SHP i SREBP-1c ad 6”

Kwasy żółciowe obniżają poziom trójglicerydów poprzez szlak obejmujący FXR, SHP i SREBP-1c ad 5

U myszy ekspresja MCAD i LCAD znacznie zmniejszyła się po 7 dniach leczenia CA. Co interesujące, u myszy KK-Ay nie zaobserwowano zmian w ekspresji tych genów. Tak więc zwiększona ekspresja genów zaangażowanych w P-utlenianie kwasów tłuszczowych nie jest odpowiedzialna za zmniejszenie TG w surowicy. Oprócz tych różnic w genach związanych z utlenianiem a, nie zaobserwowano większych różnic między wynikami uzyskanymi u myszy KK-Ay i C57BL / 6J. Tabela 1CA zmniejsza ekspresję SREBP-1c i innych genów lipogennych. Continue reading „Kwasy żółciowe obniżają poziom trójglicerydów poprzez szlak obejmujący FXR, SHP i SREBP-1c ad 5”

Kwasy żółciowe obniżają poziom trójglicerydów poprzez szlak obejmujący FXR, SHP i SREBP-1c czesc 4

Co ciekawe, CA znacznie obniżyło poziomy krążących TG u obu myszy KK-Ay na normalnej karmie (51%) i na diecie wysokotłuszczowej (65%). Całkowity cholesterol w osoczu również był zmniejszony (24% w przypadku normalnej karmy dla dzieci i 35% w diecie wysokotłuszczowej, Figura 1A). Karmienie CA zmniejszyło FFA osocza, szczególnie u myszy na diecie wysokotłuszczowej (Figura 1A). Wysokosprawna analiza chromatograficzna lipoprotein wykazała, że podawanie CA zmniejszało TG w osoczu głównie poprzez zmniejszenie liczby TG VLDL i obniżenie poziomu cholesterolu głównie poprzez obniżenie poziomu cholesterolu HDL. CA zasila zwiększone poziomy cholesterolu LDL (Figura 1B). Continue reading „Kwasy żółciowe obniżają poziom trójglicerydów poprzez szlak obejmujący FXR, SHP i SREBP-1c czesc 4”

Kwasy żółciowe obniżają poziom trójglicerydów poprzez szlak obejmujący FXR, SHP i SREBP-1c cd

Każda studzienka zawierała 64 ng reportera lucyferazy i 4 ng plazmidu ekspresyjnego P-galaktozydazy. Gdy wskazano, transfekowaliśmy 16 ng RXRa, 16 ng LXRa, 16 ng LRH-1, 32 ng plazmidu ekspresyjnego SHP lub odpowiadających im pustych wektorów ekspresyjnych. Po 6 godzinach inkubacji z kompleksami DNA-lipofektaminy, pożywkę transfekcyjną wymieniono na pożywkę z lub bez wskazanych ligandów. Ligandy dla LXR i RXR rozpuszczono w etanolu lub DMSO i dodano do komórek w DMEM uzupełnionym 10% surowicą z niedoborem lipoprotein. Aby zahamować aktywację SREBP-1c przez przetwarzanie, prowadząc do indukcji sprzężonej ekspresji SREBP-1c, pożywka stosowana w badaniu promotora SREBP-1c była również uzupełniona 10 .g / ml cholesterolu i .g / ml 25-hydroksycholesterolu. Continue reading „Kwasy żółciowe obniżają poziom trójglicerydów poprzez szlak obejmujący FXR, SHP i SREBP-1c cd”

Kwasy żółciowe obniżają poziom trójglicerydów poprzez szlak obejmujący FXR, SHP i SREBP-1c ad

Może to doprowadzić do zmniejszenia produkcji TG. Tutaj przedstawiamy dowody na poparcie pierwszej hipotezy i pokazujemy, że kwasy żółciowe, aktywując FXR, indukują ekspresję SHP. SHP następnie zakłóca ekspresję SREBP-1c przez hamowanie aktywności LXR i ewentualnie innych czynników transkrypcyjnych, które stymulują ekspresję SREBP-1c. Metody Materiały. Cholesterol, 22 (R) -hydroksycholesterol, 25-hydroksycholesterol, CA i CDCA otrzymano z Sigma-Aldrich (St. Continue reading „Kwasy żółciowe obniżają poziom trójglicerydów poprzez szlak obejmujący FXR, SHP i SREBP-1c ad”

Kwasy żółciowe obniżają poziom trójglicerydów poprzez szlak obejmujący FXR, SHP i SREBP-1c

Badaliśmy wpływ kwasów żółciowych na homeostazę trójglicerydów (TG) za pomocą kombinacji modeli molekularnych, komórkowych i zwierzęcych. Kwas cholowy (CA) zapobiega gromadzeniu się TG w wątrobie, wydzielaniu VLDL i podwyższonej TG w surowicy w mysich modelach hipertriglicerydemii. Na poziomie molekularnym CA zmniejsza wątrobową ekspresję SREBP-1c i jego docelowych lipogennych genów. Poprzez zastosowanie mutantów myszy dla krótkiego partnera heterodimerycznego (SHP) i receptora X wątroby (LXR). i a, demonstrujemy zasadniczą zależność zmniejszenia ekspresji SREBP-1c przez agonistów zarówno naturalnego, jak i syntetycznego farnezoidu X receptora (FXR) zarówno na SHP, jak i na LXR. Continue reading „Kwasy żółciowe obniżają poziom trójglicerydów poprzez szlak obejmujący FXR, SHP i SREBP-1c”

Rola limfotoksyny powierzchniowej w eksperymentalnym autoimmunologicznym zapaleniu mózgu i rdzenia niezależna od LIGHT ad 11

Testowaliśmy, czy było to spowodowane niezdolnością do generowania odpowiedzi limfocytów T na inne autoepitopy EAE, takie jak PLP178. 191 i MBP84. 104 (rozprzestrzenianie się epitopów). Jednak w naszych rękach reakcje limfocytów T CD4 + ex vivo na te peptydy u zwierząt traktowanych kontrolą były bardzo słabe, a zatem różnice między grupami leczenia były niemożliwe do zinterpretowania (dane nie pokazane). Po drugie, stosując system transgeniczny T komórka DO11.10, traktowanie LT (3-Ig nie miało wpływu na pobudzanie i ekspansję komórek T in vivo. Continue reading „Rola limfotoksyny powierzchniowej w eksperymentalnym autoimmunologicznym zapaleniu mózgu i rdzenia niezależna od LIGHT ad 11”

Rola limfotoksyny powierzchniowej w eksperymentalnym autoimmunologicznym zapaleniu mózgu i rdzenia niezależna od LIGHT ad 10

Wyniki te są znaczące z kilku powodów. Po pierwsze, LT3-Ig jest inhibitorem o podwójnej ścieżce wiążącym się zarówno z powierzchnią LT, jak iz drugim ligandem1. Hamowanie wiązania LIGHT do LT. R lub HVEM jest atrakcyjnym mechanizmem do wyjaśnienia aktywności LT. R-Ig w wielu modelach, ale tutaj wykazaliśmy, że aktywność LT niezależna od LIGHT musi być krytyczna dla funkcji komórek T w EAE. Continue reading „Rola limfotoksyny powierzchniowej w eksperymentalnym autoimmunologicznym zapaleniu mózgu i rdzenia niezależna od LIGHT ad 10”

Rola limfotoksyny powierzchniowej w eksperymentalnym autoimmunologicznym zapaleniu mózgu i rdzenia niezależna od LIGHT ad 8

Eksperyment przeprowadzono również w dniu 10 i dniu 39 z podobnymi wynikami. Aby zbadać, czy wpływ na komórki T odpowiada zapobieganiu stanom zapalnym i demielinizacji w tkance docelowej, ustalono odcinki szyjne, grzbietowe i odcinek lędźwiowy rdzenia kręgowego R-EAE i zbadano histologicznie pod kątem infiltracji leukocytów i barwienia LFB w celu demielinizacji. W porównaniu z rdzeniowymi rdzeniami nieimmunizowanych myszy SJL (Figura 5, a (3d), rdzenie kręgowe od dnia 59, immunizowane myszy leczone kontrolnym wykazują dowody na nacieki leukocytów zarówno w istocie białej, jak i szarej (Figura 6, e i g). Odpowiadające tym miejscom nacieku leukocytów, istnieją poważne luki w barwieniu LFB, które identyfikuje mielinę zlokalizowaną w istocie białej OUN (Figura 6, f i h). Przeciwnie, badanie rdzeni kręgowych z myszy R-EAE traktowanych LT-R-Ig (3 wykazało bardzo małą infiltrację leukocytów (Figura 6, i i k) i minimalną degradację mieliny (Figura 6, j i 1). Continue reading „Rola limfotoksyny powierzchniowej w eksperymentalnym autoimmunologicznym zapaleniu mózgu i rdzenia niezależna od LIGHT ad 8”